乙肝定量检测的临床应用-龚丽坤.pdfVIP

乙肝两对半定量检测的临床运用 楚雄州人民医院检验科 龚丽坤 楚雄州人民医院 内 容  乙肝两对半定量检测的必要性。  定量检测方法学的选择。  乙肝两对半定量检测的临床运用。 楚雄州人民医院 乙肝定量检测的必要性  亚洲是乙肝病毒肆虐的重灾区，全球2/3 以上 的慢性乙肝患者生活在亚洲。而根据1992年 全国乙肝血清流行病学调查的结果，中国的乙 肝病毒携带者近1.3亿人，平均每10个人就有 一个，感染率更高达57.6% 。  2008年4月，卫生部公布了最新的全国人群乙 肝等有关疾病血清流行病学调查结果：HBsAg 携带率为7.18%，携带者仍然达9300万人。可 见乙肝的防治工作所面临的形式依然严峻。我 们应充分认识到乙肝危害的严重性和长期性。 楚雄州人民医院 为保障广大人民群众的身体健康，提高人口素质，有效控制病毒性 肝炎（HBV、HCV）艾滋病和梅毒等传染性疾病的传播，加强肝炎、 艾滋和梅毒等传染病的预防与控制工作，国家制定了 《中华人民共 和国传染病防治法》、 《艾滋病防治条例》及最新的 《中国预防与 控制梅毒规划（2010-2020年）》。 楚雄州人民医院  按照卫生部 《临床输血技术规范》相关规定,要求对输血前和 手术前(包括产前)患者进行血液传播性疾病的血清指标检测， 即乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)、人类免疫缺陷 病毒( Ⅰ型, Ⅱ型)抗体(抗HIV l/2)、梅毒抗体（TP ）四项传染性 指标。  我国2012年发布的 《中国丙型病毒性肝炎医院感染防控指南》 中要求：进行外科手术及侵入性诊疗操作(所有涉及外科操作 的内科、内镜以及妇科、产科、牙科等的常规医疗操作)患者 在进行操作前筛查丙肝病毒抗体；血液透析患者首次血液透 析前应进行丙肝病毒抗体检测，丙肝病毒抗体阴性者在血透 中建议定期(半年)进行丙型病毒性肝炎的筛查。  这对于避免医源性感染、预防医务人员的职业感染， 防止出 现医疗纠纷有积极意义。 楚雄州人民医院 目前状况 目前国内检测HBV感染血清学标志物运用较多仍然是酶联 免疫吸附实验（ ELISA ）。 缺点:无法定量、灵敏度低、无法完成HBV感染的动态观 察及低水平HBV感染指标检测。 胶体金检测技术：检测时间较短。 不需要特殊设备，操作简单。 灵敏度低、特异性差、假阳性假阴性的 问题难以克服。 楚雄州人民医院 方法学的变迁  60年代末70年代初的琼脂扩散法，依次发展 为血凝法、酶联免疫吸附(ELISA)、同位素免 疫标记（RIA）、化学发光免疫分析、生物发 光、电化学发光免疫标记和80年代中建立的稀 土离子荧光免疫标记技术。  方法学每发展一步，乙肝标志物检出的灵敏度 和准确性都得到不同程度的提高。  乙肝标志物的定量检测成为主流。 楚雄州人民医院 定量检测的方法学  化学发光技术  电化学发光技术  时间分辨荧光免疫分析技术  高敏化学发光酶免疫测定技术 楚雄州人民医院 方法学的选择  时间分辨荧光免疫分析仪(Easy-Cuta) 楚雄州人民医院 时间分辨荧光免疫分析技术  反应原理：用具有双功能基团结构的螯合剂， 使其一端与铀（Eu）连接，另一端与抗体/抗 原分子上的自由氨基连接，形成铀标记的抗体 /抗原，经过免疫反应之后生成免疫复合物。 由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱，因 此加入一种增强剂，使Eu3+从复合物解离下 来，自由Eu3+同增强剂中的另一种螯合剂螯 合形成一种胶态分子团，这种分子团在紫外光 的激发下能发出很强的荧光，信号增强了百万 倍。根据荧光值的多少来计算待测物的浓度。 楚雄州人民医院  High Sensitivity CLEIA  高敏化学发光酶免疫测