GB/T 17811-1999动物蛋白质饲料消化率的测定　胃蛋白酶法.pdf

GB/T 17811-1999 前 言 本标准等效采用美国公职分析化学家协会(AOAC)(1995年版)((动物蛋白质饲料的胃蛋白酶消化 率测定方法 过滤法》。 在技术内容上，原方法中所用的“恒温搅动器”，根据实际情况改用恒“温平转摇床”;再则，限于国内 试剂条件，选用市场上易购的胃蛋白酶试剂(1:3000)代替原方法指定的胃蛋白酶试剂(1:10000)o 本标准由中华人民共和国国内贸易部提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心(武汉)负责起草。 本标准主要起草人:屈利文、钱防。 中华人民共和国国家标准 动物蛋白质饲料消化率的测定 胃 蛋 白 酶 法 GB/r 17811- -1999 Determination of digestibility in animal protein feeds-Pepsin method 1 范围 本标准规定了动物蛋白质饲料消化率的胃蛋白酶测定方法 本标准适用于所有动物性蛋白质饲料，不适用于植物性蛋白质或混合饲料消化率的胃蛋白酶测定 方法。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T 6432-1994饲料中粗蛋白测定方法 GB/T 6433-1994饲料粗脂肪测定方法 GB/T 6682-1992分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 脱过脂的试样，用温热的胃蛋白酶溶液，在恒温、持续不断地搅拌下消化16h，过滤分离不溶性残 渣，洗涤、干燥，测定残渣的粗蛋白含量。同时，测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白含量。 4 试剂 本标准所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯 实验室用水应符合GB/T 6682中三级水的规格 4门 0.20胃蛋白酶溶液:将6.1 mL浓盐酸稀释至1 000 mL水中(溶液pHl-2)，加热至42^-45C , 加入2g活性为1:10 000生化级胃蛋白酶〔若活性不是1 e 10 000，可使用活性1:3 000生化级胃蛋 白酶‘〕(不可使用非生化级胃蛋白酶)，应注意胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶浓度应为每毫升201U D，并缓慢 搅拌直至溶解 勿在加热板上加热胃蛋白酶溶液或配制时过热。临用前配制。 4.2 乙醚 4.3 丙酮。 4.4定氮试剂:按GB/T 6432中试剂及配制方法规定。 采用说明: 1) Ac)AC中指定为t : 10 000 国家质it技术监督局1999一08一10批准 2000一02一01实施 标准分享网 免费下载 GB/r17811-1999 5 仪器、设备 5 1 恒温式平转摇床，〕:温控范围20^-50C，水浴式或空气浴式均可，转速可调(15^300r/min). 2 5 实验室用样品粉碎机 5 3 索氏抽提器、脱脂设备:按GB/T6433中仪器、设备规定。 定氮仪器、设备:按GB/T6432中仪器、设备规定。 ;.;实验室常用仪器、设备。 6 试样制备 取具有代表性试样，用四分法缩分至200g，然后粉碎至全部过。.90mm孔筛(2。目)，混匀装于密 封容器，保存备用。 7 测定步骤 7.1 脱脂 称取1-2g试样用乙醚(4.2)脱脂(含脂肪小于1%可不脱脂，含脂肪10010%建议脱脂，含脂肪 大于10%则必须脱脂)。脱脂方法可参照GB/T6433中粗脂肪抽提方法进行。脱脂后的样品需烘干。 了.2 胃蛋白酶消化 称取脱脂烘干((7.1)后的样品若干克(精确至。.0002g，含氮量约5-80mg)于250ml带盖磨口 瓶中，加150ml新配制的并已预热至42.45℃的胃蛋白酶溶液((4-1)，要确保样品完全被胃蛋自酶溶 液浸湿，盖紧瓶盖，将瓶夹于恒温摇床((5.1)上，于45℃恒定搅动16h进行保温消化。 7.3 消化