GB/T 22916-2008水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测方法.pdf

犐犆犛１１．２２０ 犅４１ 中华人 民共和 国国家 标准 ／ — 犌犅犜２２９１６ ２００８ 水泡性口炎病毒荧光犚犜犘犆犚检测方法 犘狉狅狋狅犮狅犾狅犳犳犾狌狅狉狅犲狀犻犮犚犜犘犆犚犳狅狉狏犲狊犻犮狌犾犪狉狊狋狅犿犪狋犻狋犻狊狏犻狉狌狊 犵 　　 ２００８１２３１发布 ２００９０５０１实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 ／ — 犌犅犜２２９１６ ２００８ 前 言 　　 本标准参考了世界动物卫生组织（ ）《陆生动物诊断试验和疫苗手册（哺乳动物、禽鸟与蜜蜂）》 ＯＩＥ 　　 第 版）。 （ ５ 本标准的附录 为规范性附录，附录 为资料性附录。 Ａ Ｂ 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：花群义、周晓黎、曾少灵、曹琛福、詹爱军、张彩虹、林庆燕、陈兵、杨云庆、孙洁。 Ⅰ ／ — 犌犅犜２２９１６ ２００８ 水泡性口炎病毒荧光犚犜犘犆犚检测方法 １ 范围 　 本标准规定了水泡性口炎病毒荧光 ＲＴＰＣＲ检测的操作方法。 本标准适用于动物及其产品中水泡性口炎病毒的检测。 ２ 缩略语 　 下列缩略语适用于本标准。 ２．１ 荧光 犚犜犘犆犚 　 荧光反转录 聚合酶链反应。  ２．２ 犆狋值 　 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。 ２．３ 犚犖犃 　 核糖核酸。 ２．４ 犇犈犘犆 　 焦碳酸磷酯。 ２．５ 犘犅犛 　 磷酸盐缓冲盐水（配方见附录 ）。 Ａ ２．６ 犜犪 酶 　 狇 犜犪 ＤＮＡ聚合酶。 狇 ２．７ 犞犛犞 　 水泡性口炎病毒。 ３ 原理 　 水泡性口炎病毒属 ＲＮＡ病毒，根据水泡性口炎病毒两型共有基因特定的序列，合成一对特异性引 物和一条特异性的荧光双标记探针。通过严格设计和筛选的引物和探针，涵盖水泡性口炎病毒的两个 型和突变株，为水泡性口炎病毒的特异性通用引物和探针。探针的 端标记 荧光素，它发出的荧 ５′