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改进的快速冷冻-冷冻置换法对胞壁松弛因子的分布及囊泡运输的超显微水平的分析
改进的快速冷冻．冷冻置换法对胞壁松弛因子的分布及
囊泡运输的超显微水平的研究
中文摘要
f植物细胞的扩大生长是植物生命活动的一个重要方面，目前对扩大生长的研究集中在
对胞壁的松弛机理的探讨。胞壁松弛的分子假说认为胞壁的抗张力主要是由张紧的以氢键
附着在相邻纤维素微纤丝表面的半纤维素丝来维持，这些半纤维素丝张力的释放就产生胞
壁松弛。该张力的释放基本有两法，但均依赖壁中蛋白(或酶)的作用，切断张紧的半纤
维素丝，或打断半纤维紊丝与纤维素微纤丝表面的氢键联系。属于第一类的有纤维素水解
酶，XET等。执行第二类功能的目前仅有Expansin。这些蛋白(酶)就称作胞壁松弛因子。
电镜研究是对胞壁松弛因子的分布与运输过程的重要手段之一。电镜研究领域普遍认为快
速冷冻固定-冷冻置换法与化学固定法相比在保存生物细胞和组织超微结构方亟有许多优
点，但迄今为止快速冷冻固定．冷冻置换法对植物材料的处理仍不够成功，而且仪器和运转
费用均十分昂贵0本工作首先对超微结构研究中的快速冷冻一冷冻置换法作了改进，使用高
速投掷器与零热容样品持有器同时结合非渗透保护剂的使用首次成功地观察到了轮藻细胞
的超微结构。改进后的快速冷冻-冷冻置换法无论仪器本身或运转费用均十分低廉，是～种
适合我国国情的方法。本工作用免疫金标对纤维素酶及果胶酶在轮藻细胞内的分布作了初
步研究。结果表明，迅速生长的细胞具有众多黑色囊泡，免疫金标清楚地显示纤维素酶位
于该囊泡的单层包被膜下及胞壁中。成熟细胞中未观察到黑色囊泡，但果胶酶及纤维素酶
的双重免疫金标显示在胞壁中有这两种酶的分布。
关键词：快速咤梦固定冷场粤熬胞壁氅尹因子塑!塑运输轮萝
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