猫爪草提取物对临床分离结核分枝杆菌蛋白质组表达的影响.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’() *! 1( *# 年 月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ +,-,./,0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 猫爪草提取物对临床分离结核分枝杆菌蛋白质组表达的影响 ， 4 $ $ 何 颖 乐 军 胡昌华 王洪海 谢建平 （西南大学生命科学学院现代生物医药研究所 重庆 !%%3 ） $ （复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室 上海 $%%!44 ） 4 上海市肺科医院 上海 ） （ $%%!44 摘 要：猫爪草已经临床治疗耐药结核病，但其作用机理和有效成分尚不清楚。为研究其可能的作用靶标，采用双 向电泳技术比较分析猫爪草提取物作用前后结核分枝杆菌临床分离株的全细胞蛋白表达差异。发现$$ 个蛋白质 斑点具有明显差异，对其中 个表达明显下调的蛋白质斑点进行基质辅助激光解吸 电离飞行时间质谱分析，获得 4 J 了肽质量指纹图谱。数据库检索分析确定这 个点代表的蛋白质分别为硫代硫酸硫转移酶，延长因子 和热休克 4 8E 蛋白K，分别参与厌氧硫代谢、蛋白质翻译和蛋白质折叠分泌、转录调控等过程。这有助于深入研究猫爪草对结核 分枝杆菌的作用机理，也为发现新的抗结核病治疗药物靶标提供了线索。 关键词：猫爪草，结核分枝杆菌，蛋白质组，双向电泳，差异表达 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） L24# M %%%9#$%2 $%% %#9%729% 结核病是由结核分枝杆菌（ !#$%#’()*+, ! 材料和方法 ’+%()#+-$.*. ，以下简称 N86 ）引起的严重威胁人类健 康的重要传染病，其死亡率在全球单一细菌性病原 ! ! 材料 体感染导致疾病中最高。每年世界上有近4%% 万人 ! ! ! 菌株和培养：异烟肼耐药N86 由上海市肺 死于结核病，全球约 J4 人口感染过结核分枝杆 科医院检验科分枝杆菌检验室提供，经平板传代表 ［］ 菌 。耐多药结核分枝杆菌日益增多，以及与 明遗传稳定。细菌在 （ ）添加 OP’ NTT),/0((U 3O2 +V-( （ 牛血清白蛋白， 葡萄糖， 油 病毒共