新鲜羊膜移植术治疗急性期角碱烧伤的试验性分析.pdfVIP

中文摘要 新鲜羊膜移植术治疗急性期角膜碱烧伤的 试验性研究 摘 要 目的：通过对新鲜羊膜移植术在急性期角膜碱烧伤 的治疗中角膜表面表达基质金属蛋白酶(MMP．1，MMP．9) 及其抑制剂(TI脚．1)，细胞问粘附分子(ICAM．1)的改 变，以及角膜超微结构的变化的研究，探讨新鲜羊膜移植 术在角膜表面重建的过程中抑制炎症，防止角膜溃疡，促 上皮愈合的作用，并与保存羊膜作比较。 方法：选用健康新西兰大白兔36只，试验前裂隙灯 检查无眼前段病变。实验中所用羊膜均取自健康剖宫产妇 的胎盘。新鲜羊膜4。C保存于DMEM培养液中，24小时 内使用，保存羊膜．4。C保存于100％甘汕内，一月内使用。 所有实验动物选择右眼为试验眼制作碱烧伤动物模型，随 机将实验动物分为新鲜羊膜移植组，保存羊膜移植组和划‘ 照组，每组12只。新鲜苇膜移植组和保存羊膜移植组24 小时内实行羊膜移植术。术后裂隙灯显微镜观察眼表情况 及羊膜植片存活状态。 每组动物分别于术后7天，14天，空气栓塞处死摘 除右眼球，取角膜固定于10％中性祸尔马林液中，石蜡包 埋，制成组织切片，行HE和免疫组织化学染色。使用计 算机一图像分析仪对角膜组织中的多形核细胞数(PMN) 进行数密度分析，对金属基质蛋自酶．1(MMP．1)、金属 基质蛋白埋．9(MMP．9)、金属当￡质货白酶抑制剂．1 中文摘要 (TIMP．1)、细胞间粘附分子．1(ICAM-1)进行面密度分 析。试验数据用方差分析和相关分析进行均数比较。 制作电镜标本，术后J4天取角膜固定于Karnovsky 液中，制作透射电镜样品，透射Ib镜观察，0腆组织形态学 改变。 结果：术后裂隙灯观察：对照组角膜炎症反应重，分 泌物多，角膜充血严重，角膜表面粗糙不光滑，术后第7 天可见新生血管长入，第14天角膜缘处新生血管较密集， 角膜上皮愈合缓慢。保存羊膜组有少量分泌物，炎症较轻， 术后第J0天发现新生血管，第14天角膜上皮覆盖角膜表 面。新鲜羊膜移植组粘性分泌物少，14天时角膜缘仅见 少量新生血管，角膜上皮愈合较好。各组羊膜贴附良好， 未见溶解脱落。 实验第一部分：角膜表达MMP．1，MMP·9，TIMP一1面 密度分析：术后7天，新鲜羊膜组的MMP一1、MMP一9、 0．03025 0．04388±0．00850、0．02012±0．00543、0．03222±0．00577 升高(P0．01)，保存羊膜组与对照组相比MMP．1和 术后14天，新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植组、对照组的 00394、 MMP．1和MMP．9面密度分别为O．02057±0 O 中文摘要 新鲜羊膜移植组明显低于保存羊膜移植组(P0．05)和剥‘ 照组(P0．01)，保存羊膜组也明显低于对照组(P0．01)， MM2．9新鲜羊膜移植组和保存羊膜移植组明显低于对照 组(PO05)，而新鲜羊膜移植gtq二保存羊膜移植组之间无 显著性差异(P0．05)。TLMP．1的面密度值三组分别为 新鲜羊膜组与保存羊膜组(P0．01)和列‘照组(P0．01) 相比明显降低，保存羊膜组明显低于对照组(P0．01)。 TIMP．1的面密度与MlVlP．1的面密度(r一08249，P0．01) 和MMP．9的面密度(产O．4132，P0．05)里显著负相关。 实验第二部分：组织病理学改变：光镜下，新鲜羊膜 移植组角膜多形核白细胞(PMN)浸润少，已形成双层角膜 上皮细胞且排列整齐、规则，胶原纤维排列整齐；对照组 角膜表面及基质层有大量的PMN浸润，胶原纤维排列紊 乱，有的断裂溶解，部分角膜表面有上皮{lII胞覆盖但排列 紊乱，形状不规则。保存羊膜组介于两者之间。透射电镜 下：上皮细胞数量较少，细胞质明显水肿，线粒体嵴消失， 粗面内质网扩张成池状，有核糖体脱颗粒现象，细胞核肿 胀核畸形，核膜溶解内陷，上皮细胞表面未见微绒毛；胶 原纤维摊列紊乱，内皮细胞肿胀；保存羊膜移植组：上皮 细胞数量较多中度水肿，表面可见少量微绒毛，线粒体水 肿嵴排列紊乱部分消失，粗面内质网扩张