水稻核不育基因ms91（t）、rtms1的定位分析.pdfVIP

沈Ji【1农业大学{!!j{}学位论义 捅 斐 水稻杂种优势利用已取得很大进展，但水稻不育分子机理及不育基因克 隆研究还没有很大进展，至今为止没有水稻不育基因被克隆。本研究以天津 农学院选育的水稻普通核不育系Sh38、温敏核不育系J20S为材料进行了两 个不育系的遗传分析及不育基因的分子标记定位。同时对基因定位群体构 建、SSR标记多态性、SSR标记用于水稻籼粳分类及DNA指纹分析及SSR 标记揭示的籼粳基因组序列多态性等方面进行了分析，获得了以下主要结 果。 1．msglfj!J、rtmsl基因定位群体的构建 选用分布于水稻12条染色体上的249对SSR引物，分析ms91倒、rtmsl 不同定位群体的多态性。结果表明，明恢63与两个核不育系Sh38、J20S所 配制的组合多态性高且在12条染色体上的分布较为均匀。对Sh38、J20S与 不同材料杂交产生的F1育性进行了分析，结果表明：典型粳稻冀粳14的突 变株Sh38与一般粳稻杂交结实率正常，结实范围在78％一90％之间，而与 籼稻的结实率偏低与974、明恢63结实率分别为55．20％和38．7％；J20S与 粳226、扎昌龙、C418Fl结实率分别为83．7％、67．4％和64％，表明J20S 与不同的材料进行杂交其Fl结实率正常或接近正常。本研究所用到的 明，这些群体偏分离位点较少。综合上述三方面的结果，证明明恢63与两 个核不育系进行杂交构建的定位群体符合一个理想的定位群体应具备的三 个条件既多态性高(便于进行基因定位)、Fl育性接近正常(不淘汰任何基因 型)、偏分离率低，可以作为不育基因精细定位群体使用。 2．ms91’似基因的遗传分析与定位研究 Sh38是1996年从冀粳14中发现的自然突变雄性不育材料，通过多年 天津、海南、广州等地对Sh38进行的农艺性和育性观察，发现该不育系不 育性彻底、隐定、可恢复性强，不育性不受光、温等环境因素影响，是水稻 育种和杂种优势利用研究中罕见的新不育系种质资源。经遗传分析表明， Sh38不育性受一对隐性核基因控制，暂定名为ms91御。利用Sh38／C18、 摘要 标记的基因池多态性分析，找到了与ms91Ⅲ基因连锁的SSR标记RM5，将 ms91f黟定位于第J染色体。进一步的连锁分析将ms91似基因定位于SSR标 群体，结果表明采用多个群体对基因进行定位可以解决多态性、偏分离问题， 是一种有效的基因定位方法。 3．rtmsl基因的遗传分析与定位 J20S为天津农学院选育的水稻低温敏核不育系，通过多年多点试验的遗 传分析表明，J20S温敏不育性受一对隐性核基因控制，暂定名该基因为 rtmsl。利用SSR标记进行了J20s／j睫226F2群体不育基因池与可育基因池间 多态性分析，发现第10染色体的SSR标记RM216与rtmsl基因连锁，将 rtmsI基因定位于第10染色体。通过进一步对该F2群体的500株不育株分 了rtmsl基因区的大片段重叠群，将rtmsl基因定位于15个大片段403cM， 1445Kb之内。 4．分子标记多态性与籼粳基因组多态性的研究 在rtmsl、ms91似基因定位与克隆过程中，分析了SSR标记在不同水稻 材料中的多态性。选用分布于水稻12条染色体上的249对SSR引物，以不 同籼粳稻品种为材料，筛选到扩增多态条带3条以上的SSR引物49对，能 揭示籼粳多态性的引物6对。应用筛选到的引物在9个不同水稻品种间的扩 增结果，初步分析了SSR标记的多态性及应用于水稻指纹分析、釉粳分化分 析和聚类分析的潜力。结合水稻籼粳基因组序列图，使用DNAstar系列软 件进行基因组序列多态性比较，分析了6对能揭示籼粳多态性的SSR标记的 基因组序列多态性。 关键词；水稻；rimsI基因；ms9御，基因；基因定位；SSR 沈阳农业大学坝十学位论义 第一部分 文献综述 一、水稻雄性核不育研究 植物育性是重要的作物农艺性状之一，是杂种优势利用的关键因素，多 种不育系及不育基因的发现为作物杂种优势利用奠定了物质基础。若干年 来，新的植物不育系和杂种优势利用途径一直是生物学家和农学家研究的重 要领域。 (一)水稻雄性不育的遗传类型