游离脂肪酸致大鼠离体肝细胞胰岛素信号传导异常及阿斯匹林保护作用的分析.pdfVIP

游离脂晦酸致夫鬣离体肝细臆胰鼯素信号传导异常 及阿斯匹林保护作用的研究 研究生张东铭 导师张苏-)-S 郑州犬啦第二附属馘院 郑州450052 摘 要 糖尿瘸(Diabetesmellitus，DM)因其发病率、死亡率、致残率离丽严豢危害 人类健康。其中绝大部分为2型DM。胰疑素抵抗(insulinresistance，IR)是2 缴DM发病机制中的一个重要因素，并鼠是其他疾病，如肥胖、斑脂异常、高 囊压、冠心癍等代谢综合短的一个重要特缎。因此，IR一崖是人们研究的热点。 =j艟年来，撒的发瘸机制，尤其是备种原因引起的胰岛素信号传导辩常在IR发生 B摔觳物激酶 孛黪传建受裂较大关注。灏遂数避终疆究发瑷，核转录霆予NF-K ．13(IKK．B)的激活能干扰胰岛索信号的正常传导，参与瓜的发生。阿斯匹林 (aspirin)作为IKK-§静特异毪李露翩裁，蒸有茨渗毽靛露穗。多秘致承麴因素 均能激活IKK．B，游离脂肪酸(freeacid，FFA)是激活IKK-13的重要因素 fatty 之一，也怒m发病机稍中的一个霪要因素。大螯体内、辩研究表裙，FFA麓鹤 substrate．1，IRS．1)的酪氨酸残基磷酸化水平，从而干扰胰岛素信母豹正 receptar 豢簧导，参与l玟瓣发生。IRS-2怒鼹赃内蛇主要IRS亚型，IRS-2酪氨酸残基磷 酸化水平降低可致肝脏IR。目前尚未见FFA对肝脏IRS-2影响的研究报道。作 者薅歪鬻天鬣器缀麓添钱臻养熬方法，鼹察FFA秘瓣鬏颗爨对黟缨庭／RS*2酪 氨酸残基磷酸化及其蛋白含量的影响，探讨IKK-B激活致IR的机制及阿斯匹林 对取的防治作确。 材料与方法 实验用成年Wistar大鼠、以两步灌流法分离，培养肝细胞，待肝缬施长满 acid)和姆簸匹转进行药物干预实验。实验共分 熔蓁叛藏压戥软勰酸(palmitic 盈然魈鳃撼毽塾懿塑懿隧黼涟醚麟隧透瓣糯受璇麓夔磁隧豳瑟颤整 醋缝。l缀：鞋营通培养滚与丈鬣勰缨鼹共鹅瓣育；珏维：FFA楚蘧组，戳食 palmitie u acid(25 鳃，鞋含p趣嫩＆acid(25器氧黔，酬斑逶5捌嗡魏壤养渡与丈鬣器臻薅共瓣孵蠢； 分剩槎孵旁勰蕊辩黻200nlvl Insulin麓激10min，滚滚冷灏PBS羚浚终变蔽藏， 裂嬲缒骝，掇凝蛋是，免疫沉淀，Western blot捡测IRS-2餐盘含量嬲／RS．2酪寨 酸虢黢纯拳泽，器缀备霹翔患筠蘩蒙9次。 缝聚 1．Palmitic acid和黼斯遥秫粒大鬣瓣辅施IRS．2酪氨陵残基磷黢亿永甲的澎晌 Falmitie acid(25咎蠲写大鬣嚣缫魑共鬻瓣弯魏鞠馥浚麓骥盟糖餐翳细蓬 茇爨裔显瓣性，P0。05。 簿豢嚣拣≤s蠢喝鞍Palmitict．1确菸羁与器缀熬瓣窍链鞫馥，黪冁基 acid(25 箨粼Palmitie 翻为79．铡4-3．91释76．02士2．37)，与Palmificp确孵裔维(Western辩迹 acid(25 获壤蠖分裂装29,49圭3。旌帮20．t84-1,57)滋较，磐异毒盥萋蛙，P0。05。 单用阿斯匹林(SmM)-对肝细胞欺蔺孵育2h和黼，IRS-2酪氨酸磷酸忧水平 2，Palmilie acid霾掰麓嚣拣怼大鬣翳缨蕤IRS-2蛩怒蔟含爨稳彰穗 Palmifie acid(25#婚与大鼠瓣绷腿共尉孵2小对对野缨胞IRS-2爨皂食凝舱 影嫡(Western臻邃教度蓬为77，耨±3．57)，与瓣爨缀(w娥e黼秘遴莸度经魏嚣．筠 ±3。37)魄较，差辩嚣显萋悭，P0．05，Palmitieac