Henna 基因突变是导致北京紫眼果蝇眼部蝶呤含量减少的重要原因.PDF

中国科学 C 辑 :生命科学 2008 年 第 38 卷 第 8 期 : 742 ~ 750 SCIENCE IN CHINA PRESS Henna 基因突变是导致北京紫眼果蝇眼部 蝶呤含量减少的重要原因 * * 王勤, 赵春江, 白丽华, 邓学梅, 吴常信 中国农业大学动物科技学院, 农业生物技术国家重点实验室, 农业部畜禽遗传育种重点开放实验室, 北京 100193 * 联系人, E-mail: deng@; chxwu@ 收稿日期: 2008-02-03; 接受日期: 2008-03-12 国家重点基础研究发展计划(批准号: 2006CB102100)和国家自然科学基金(批准号:资助项目 摘要 苯丙氨酸羟化酶被认为参与黑腹果蝇眼部蝶呤代谢, 但是始终都缺乏 关键词 有力证据. Henna 是苯丙氨酸羟化酶的编码基因, “北京紫眼”果蝇(Hnbp)是Henna 黑腹果蝇 基因的一个隐性突变体, Hnbp 突变形成的原因是Henna 基因的第二外显子上具 (Drosophila melanogaster) 有插入片段. 在Hnbp 中, 其编码产物的 Biopterin-Hydroxyl 功能域中增加了 15 果蝇蝶呤 个氨基酸残基. 蛋白预测结果显示, 插入的残基改变了原有的蛋白结构, 这种 北京紫眼果蝇 苯丙氨酸羟化酶 变化很可能降低了苯丙氨酸羟化酶与四氢生物蝶呤结合的能力. 为了恢复突变 Henna 基因 表型, 利用 UAS-GAL4 转基因体系使野生型Henna 基因在Hnbp 的背景下表达. 在双拷贝的转基因系GMR-GAL4 UAS-Henna/UAS-Henna; Hnbp/Hnbp 中, 突变表 型得到完全恢复：果蝇的眼色由突变体的紫色恢复到野生型的红色, 蝶呤含量 也从突变体的30升至98, 与野生型差异不显著(P 0.05). 上述实验结果充 分说明, Henna 基因突变是导致 Hnbp 突变体眼部喋呤含量降低的重要原因, 为 苯丙氨酸羟化酶参与果蝇眼部蝶呤代谢提供了体内实验的直接证据. 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)眼部有两种 所以这个假说并没有被广泛认可. “北京紫眼”果蝇 色素：红色的果蝇蝶呤(drosopterins)和棕色的眼黄素 (Hnbp)是本实验室从北京野生型中分离出来的Henna (ommochrome). 果蝇喋呤是神经递质儿茶酚胺代谢 基因紫眼隐性突变体. 本研究分析了Hnbp 突变体的 通路中重要的中间体四氢生物喋呤(tetrohydro- 分子特征, 并利用UAS-GAL4 体系[14], 对突变表型 biopterin, BH [1] 4) 的代谢产物 . 二氢生物蝶呤(dihydrop- 进行了恢复. 希望通过对Hnbp 突变体形成的分子和 terin)和嘧啶并二氮杂卓(pyrimido-diazepine, PDA)是 生化机制的研究, 为Henna 编码的苯丙氨酸羟化酶 果蝇蝶呤的两个前体. 其中, PDA的形成过程已经清 [2] [3] 参与果蝇体内二氢蝶呤的形成的假说提供有力的遗 楚, 参与合成的两个关键基因 sepia 和clot 也已 被克隆. 但是, 到目前为止还不清楚二氢