南海深海沉积物烷烃降解菌的富集分离与多样性 - 中国表面活性剂网.PDF

维普资讯 47卷 5期 微 生 物 学 报 47(5)：869～873 2007年 l0月 4日 ActaMicrobiologicaSinica 4October2007 南海深海沉积物烷烃降解菌的富集分离与多样性初步分析 刘 真 ，邵宗泽， (厦门大学生命科学学院 厦门 361005) (国家海洋局第三海洋研究所 海洋生物遗传 资源重点实验室 厦 门 361005) 摘 要 ：通过培养和非培养 2种手段研究了南海沉积物 中石油降解菌的多样性 。通过烷烃富集培养 ，从 2个站点 不 同深度 的南海沉积物样 品中富集筛选 出48株深海细菌，其 中27株对十六烷有降解能力。表面张力测定结果表 明，4株降解菌同时具有较强的表面活性剂产生能力，2株 Dietziamaris菌能使水的表面张力降至 33mN／m左右 ，这 是该种微生物产表面活性剂 的首次报道 。通过变性梯度凝胶 电泳 (DGGE)分析显示 ，南海沉积物富集物 中的烷烃 降解菌优势菌是芽孢杆菌，而且有多种。其 中，Bacillusaquimaris在两个站点的7个样品的富集物 中都是优势菌 。 此外，Sporosarcina，Halomona以及Brevibacterium属的细菌在不同样品中也表现为除Bacillus之外的优势菌。 关键词 ：南海 ；深海沉积物 ；石油降解菌 ；生物 多样性 ；生物表面活性剂 中图分类号：Q938 文献标识码 ：A 文章编号：0001—6209(2007)05—0869—05 石油是海洋环境中的重要污染物，烷烃是石油 1 材料和方法 的重要组成成分 。但是其疏水性往往不利于微生物 对其快速降解。化学表面活性剂虽然可以驱散油或 1．1 实验材料 加大其水溶性…，但是由于其生物毒性 ，往往会阻碍 南 海 泥 样 沉 积 物：站 点 Nl：18．667。(E)， 微生物对油的利用。生物表面活性剂 (biosurfactant) 116．540。(N)，深度为 3649m；站点 N3：17．161。(E)， 是由微生物 ，植物或动物产生的天然表面活性剂 ，相 110．136。(N)，深度为 1166m。均为 2005年 “海洋一 对于化学表面活性剂，它无毒害、易降解 、活性高 。 号”南海试航所采。采样设备为沉积物多管采样器。 研究发现 ，烃类降解菌往往产生表面活性剂 ，以促进 采集的沉积物高度分别为 22cm和 31cm，并分别有 烃类的降解。 上覆水 39cm和30cm。沉积物样 品每 5cm一层分装 深海是一个低温、高压的独特环境 ，深海沉积物 于采样杯 中，于 4℃保存。本实验选用 的沉积物样 中蕴藏着丰富的微生物资源 。但是 目前人们只是 品层次为 ：站点 N1的0～5cm、10～15cm、15～20cm 对近海环境中的石油降解菌了解较多 ，而对深海 和站 点 N3的 0～5cm、5～ 10cm、10～ 15cm 和 环境知之甚少 。了解深海环境中石油降解菌的多样 15～20cm，共 7个样品。 性 ，不仅有助于了解环境污染物在海洋环境 中的归 1．2 烷烃降解菌的富集 宿 ，也能有助于获得特殊 的降解微生物资源 ，用于环 在含有 50mL无机盐培养基的 250mL三角瓶 中 境污染的治理。 目前 ，DGGE在分子生态学上 的应 富集培养烷烃降解菌 ，十六烷的含量为 2％(V／V)。 用极大地丰富了人们对微生物生态的认识 ，它