蛋白激酶C（PKC）与肾细胞癌多药耐药相关性的分析.pdfVIP

中文摘要 目 的． 肾细胞癌是泌尿系肿瘤中对化学治疗效果较差的肿瘤之一， 其主要原因是对化疗药物存在内在的耐受性，即肾癌存在多药耐 resistance，MDR)。／‘肿瘤细胞的多药耐药机制与多 药(Mu2tidrug 种因素有关，目前研究比较清楚的主要为多药耐药基因l(mdrl) 的产物P一糖蛋白(P—gP)和多药耐药相关蛋白(MRP)。现有的 研究表明蛋白激酶C(PKC)可能参与肿瘤发生、发展、转移和多药 耐药等过程的信号传递，PKC是一种钙离子激活，磷脂依赖性的 蛋白激酶，是细胞内信号传递中的关键分子之一。)在多种肿瘤细 胞组织中已发现PKC活性的增加，但与肾细胞癌和其多药耐药的 研究未见报道。因此探讨PKC在肾细胞癌中的表达以及与肾癌 多药耐药的关系对揭示肾癌的发生、发展和寻求新的逆转肾癌多 药耐药的治疗方法具有十分重要的理论与实际意义。 实验方法 组织标本：收集中国医科大学第一临床学院泌尿外科2001年 8月至12月手术切除并经病理证实为肾细胞癌的新鲜癌组织及 癌旁组织各30例，其中男性20例，女性lO例，年龄32-73岁，平 均年龄52．8岁。 实验方法：1．采用Takai法测定肾癌及癌旁组织蛋白激酶C (PKC)活性。 实验结果 (1)与癌旁组织相比较，肾癌组织胞浆、胞膜PKC活性明显升 高，差异有显著性；在肾癌组织中随分期、分级的增高而显著性增 高。膜质比研究表明，肾癌组织中PKC膜质比高于癌旁组织，说 明PKC在肾细胞癌癌变的过程中发生了膜转位。 (2)P—gpmRNA在肾癌组织的表达率为90％，而在30例癌 旁组织中100％表达。并且在肾癌组织中的表达低于癌旁组织， 差异有显著性。不同临床分期之间肾癌组织中表达无显著性差 异，虽然在病理分级之间G。级的表达高于G。G，，但差异并无显 著性；MRPmRNA在所有肾癌组织及癌旁组织都100％表达，肾癌 组织高于癌旁组织，差异有意义。并且在肾癌组织中，随病理分级 的增高而增高，而在不同临床分期之间差异无显著性。 (3)PKC活性与肾细胞癌MDR的相关分析表明，P—gp转录 水平与PKC活性无相关性；丽MRP的转录水平与PKC活性呈正 相关，胞浆、胞膜的相关系数r分别为0．36、0．45，膜质比与MRP 的相关系数为0．62，以上相关系数检验均有意义。 讨 论 目前研究表明肿瘤的多药耐药机制并不是由单一因素决定 的，而是由许多因素共同影响的，其中最主要的就是P—gp和 MRP。蛋白激酶C是细胞内信号传递中的关键分子之一，现研究 发现多种肿瘤组织中的PKC活性增高，在有MDR性质的肿瘤组 织中PKC活性水平都显著升高。 本研究应用Takai法和RT—PCR法分别测定了肾癌组织及 癌旁组织中PKC活性及P—gP、MRPmRNA的表达。发现肾癌组 织PKC活性显著增高，并且随分期、分级增高而增高，差异均有显 著性。在所有的癌旁组织中都有P—gP的表达，表达水平高于肾 ·2· 癌组织。P—gpmRNA的表达在不同临床分期、病理分级之间元显 著差别。MRP在所有被检肾癌组织及癌旁组织都有表达，肾癌组 织高于癌旁组织，差异有意义。MRP在临床分期之间也无差异， 但在不同病理分级中差别有显著性，提示分期只代表肿瘤的浸润 程度，与耐药性的产生无关。从二者在肾癌组织中的表达情况可 以看出P—gP、MRP在肾癌组织中都有广泛的表达，对肾癌的多药 耐药发挥着重要的作用。 活性呈显著正相关，而P—gpmRNA的表达与PKC活性没有相关 性，提示PKC的高表达可能介导了MRP转录水平的提高，从而参 与了肾细胞癌多药耐药的产生，而P—gP可能没有通过PKC机制 的途径诱导肾细胞癌的多药耐药性。本研究还发现由于在癌变的 过程中PKC发生了膜转移，膜转移过程促使了肾组织的癌变和肾 癌组织的多药耐药，因此应用膜质比研究PKC活性与MRP的表 达以及肾癌多药耐药性更有意义。，。一…7 结 论 1．肾癌组织胞浆、胞膜PKC活性高于癌旁组织，随分期、分级 的增