铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药机理及临床应用分析.pdfVIP

刖 昌 自抗生素开始临床应用以来，许多致病菌及其引起的感染性疾病得以有效 控制，感染性疾病的治愈率也明显提高。特别是近二十年来，p一内酰胺类抗生 素的快速发展，为我们治疗这类疾病，尤其是耐药细菌引起的感染性疾病提供 了有力武器。然而，也正是抗生素的快速发展及广泛、大量的临床应用，导致 了多种耐药细菌的产生和流行。如此，作用更强、更广泛的抗生素又不断产生 新的耐药菌继而随之出现，循环往复，竞争愈演愈烈。在众多耐药的革兰阴性 细菌中，铜绿假单胞菌引起人们高度关注，它不仅成为革兰阴性细菌感染的主 要菌种，而且对抗生素的耐药性越来越严重。特别是对B一内酰胺类抗生素，耐 药率正逐年增高。国内外研究报道，铜绿假单胞菌对p一内酰胺类抗生素的耐药 机理涉及三个方面：外膜通透性，B一内酰胺酶和青霉素结合蛋白。p一内酰胺类 抗生素选择性地从铜绿假单胞菌外膜的特定微孔蛋白通道进入细菌细胞。在细 胞周质中作用于其靶位点，青霉素结合蛋白，最终杀灭细菌。B一内酰胺酶存在 于细胞周质中，由细菌细胞染色体和其携带的质粒编码产生，对进入细胞的p一 内酰胺类抗生素进行水解，使其失去作用。一旦细菌细胞的外膜通透性下降 进入细胞的抗生素也将减少。一旦青霉素结合蛋白与p一内酰胺类抗生素的亲和 力下降，抗生素的作用也将减弱。这三种因素相互作用，互为影响，以6．内酰 胺酶的作用最为重要，而且，诱导产生的p．内酰胺酶种类和数量不断增多，其 中由质粒介导的超广谱酶(ESBLs)和染色体介导的AmpC酶发挥的作用最 为重要。抗生素的临床疗效也因此明显下降，头孢一代抗生素几乎无明显疗效 头孢三代也出现大量耐药。碳青霉烯类及头霉素也有耐药出现。 本文对临床分离收集的铜绿假单胞菌进行了外膜通透性测定，并检测p一 内酰胺酶及酶基因，同时测定了青霉素结合蛋白亲和力，分析三者之间的相互 联系及作用，并结合临床病例进行分析研究，明确其临床意义，寻找指导临床 合理用药的依据。 铜绿假单胞菌对B一内酰胺类抗生素 耐药机理及临床应用研究 要 ’ ／ 、 目的和方法人 铜绿假单胞菌是目前引起院内感染最为常见的病原菌之一，它对临床常用 的多种抗生素都有一定程度的耐药性，而且，随着抗生素的大量、广泛及不合 理应用，其耐药性正日益严重。为此，有必要对其耐药机理进行深入研究，以 指导临床合理用药。本文重点选择了临床上应用最为广泛的B．内酰胺类抗生 素，研究铜绿假单胞菌对这类抗生素的耐药机理，并观察基盟垫扭堡与堕旦弦 效之间的联系，试图寻找更为合理的临床用药规律。危们收集了30株临床分 7一 l 离的铜绿假单胞菌，选择5种常用的B一内酰胺类抗生素，包括头孢唑啉、哌 拉西林、头孢哌酮、头孢他定和亚安培南。应用业已建立的实验方法并作改进， 测定了30株铜绿假单胞菌对这5种常用B．内酰胺类抗生素的外膜通透率。并 blot杂交法 且应用常规方法及已有的5种B．内酰胺酶基因探针，经Southern 检测30株铜绿假单胞菌产且一内酰胺酶及携带酶基因的情况。而且，进一步观 察外膜通透率及B．内酰胺酶与5种13一内酰胺类抗生素临床疗效的关系。通过 应用I“c卜青霉素和液闪同位素检测法，选择测定了亚安培南在30株铜绿假单 胞菌中的青霉素结合蛋白亲和力并对其在铜绿假单胞菌耐药中的作用进行了 研究。 结果 结果发现，30株细菌中，敏感菌株的外膜通透率明显高于耐药菌株 (PO．05)。所有菌株都携带有1-4种B一内酰胺酶基因并不同程度产酶。在5 种抗生素中，膜通透率越高，对B一内酰胺酶越稳定，细菌耐药率就越低，临 床疗效也越好。但酶基因数量的多少与产酶量并非呈正比，说明酶基因的表达 受很多因素影响。30株细菌中，耐药菌株青霉素结合蛋白亲和力明显低于敏感 菌株，说明青霉素结合