阿魏酸哌嗪和霉酚酸酯对肾脏的保护作用及其机制分析.pdfVIP

复且大掌华山医西I硕士掌位论文 中文擅要 阿魏酸哌嗪和霉酚酸酯对肾脏的保护作用及机制研究 中文摘要 ferulate，PF)是根据我国传统中药川芎的有 目的：阿魏酸哌嗪(Piperazine 效成分人工合成的一种药物，临床观察表明它能延缓肾脏功能减退，但其机制尚 不明了。本实验应用5／6肾大部切除和阿霉素肾病大鼠模型，观察阿魏酸哌嗪对 肾脏的保护作用，并初步探讨其可能的作用机制。 霉酚酸酯(MMF)是一种新型免疫抑制剂，但也有人报道MMF能抑制成 纤维细胞、血管平滑肌细胞和系膜细胞的增殖，减少细胞外基质的沉积，故我们 推测MMF对非免疫性疾病所导致的慢性肾脏纤维化可能也有一定的疗效，如同 时纠正RAS系统紊乱，可能会有更好的肾脏保护作用。为此采用5／6肾大部切 除模型，观察霉酚酸酯及与Fosinopril合用时对肾脏的保护作用，并初步探讨其 可能的作用机制。 ／材料与方法： 、 (1)在5／6肾大部切除模型中，32只大鼠被随机分成4组：假手术组(Sham 灌胃，一日一次。8周后测定大鼠24小时尿蛋白，用PAS染色和免疫组化法观 l(TGFB1) 察肾脏组织学改变及纤维连接蛋白(FN)和肾皮质转化生长因子一13 B1和Smad7的mRNA表达 的积聚情况。以半定量RT．PCR法检测肾皮质TGF 含量。采用免疫印迹法检测Smad7的蛋白表达水平。 (2)在阿霉素肾病模型中，24只大鼠被随机分成4组：正常对照组(NC 后测定大鼠24小时尿蛋白和血脂，并分别用PAS染色和免疫组化法观察肾脏组 131和I型纤溶酶原激活物抑制物(PAl．1)的积聚情况。 织学改变及FN、TGF 13l和PAl．1mRNA表达水平。 采用半定量RT-PCR法检测肾皮质TGF (3)在5／6肾大部切除模型中，44只大鼠被随机分成5组；假手术组(Sham N=1 复旦大掌华山医—I硕士掌位论文 尿蛋白，并分别用PAS染色和免疫组化法观察肾脏的组织学改变及FN和MCP一1 131和TIMP—l 的积聚以及细胞增殖情况。以半定量RT—PCR法检测肾皮质TGF mRNA表达水平。 结果：(1)在肾大部切除模型中，①PF和Fos能明显减少5／6Nx大鼠24小 时尿蛋白(P0．01)；②5／6Nx组大鼠可见明显的肾小球系膜基质增生和肾小球 硬化，阿魏酸哌嗪能明显减少肾小球硬化指数(P0．01)；③免疫组化提示FN在 5／6Nx组亦明显多于Sham组，PF能减少FN的沉积；④分别采用免疫组化和 Blot和RT．PCR证实手术后大鼠Smad7 均能使TGFl31表达水平下调；(垦)Westem ⑦MMF能减少MCP—l的表达，抑制细胞的增殖；⑧MMF和Fos均能减少肾皮 mRNA表达，合用时效果更为明显。 质的TOFIBI和TIMP一1 (2)在阿霉素肾病模型中，①ADR组大鼠24小时尿蛋白和血脂多于NC 组，PF和Fos均能减少大鼠尿蛋白(P0．01)，但PF尚能明显降低血三酰甘油 PF和Fos能抑制ADR大鼠TGFl3l和PAl．1基因表达和蛋白质表达。， 结论：(1)PF在5／6NX和ADR模型中均有一定的保护作用，这可能与它能 减少尿蛋白，降低血三酰甘油，减少细胞外基质沉积，下调TGFl31信号有关。 (2)MMF对非免疫性肾脏损害有～定的保护作用，这可能与它能抑制细 胞增殖，减少趋化因子的表达，抑制TGFpI等有关，联合应用Fos时，有更好 的肾脏保护作用，但其机制有待于进一步研究。 关键词：肾大部切谋术，阿霉≥涪病，阿魏酸哌曝，霉酚蘸目，肾小球硬化，转 化生长因子B1 兰兰查竺兰兰苎堕竺主兰竺竺查