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中国医科大学实验技术中心 复 习 提 纲 中心三部 第1 章 1. 卫生技术的基本定义是什么？(p1) 2. 现代卫生技术与医学发展间的相互作用主要体现在哪几方面？(p3~p4) 3. 何谓卫生技术评价？(p9) 第2 章 1.常用的组织细胞破碎方法有哪几种？(p18∼p19) 2.试举两种组织细胞破碎仪器，并简述其工作原理及主要用途。(p19∼p20) 3.超滤要解决常规过滤所遇到的主要技术难题是什么？并说明解决这一难题主要从哪三 个因素考虑？目前，实验室常用的超滤方法有几种，试举出两种？(p36∼p41) 浓度极化：随过滤进程，溶质中的大分子逐渐增多的截留在滤膜表面所形成的浓度梯度。 增大压力、搅动、温度。 离心浓缩管超滤：在离心力作用下快速0.05∼20ml 小样量(MWCO 100∼500000)； 加压搅拌室超滤：正压+磁力搅拌，中等体积(≤400ml) 的无颗粒稀溶液； 切向流系统超滤：正压+推动液体切向通过超滤膜，100∼2000ml 样品液(或更多) 。 4.减压蒸发较常压蒸发的优点是什么？如一样品溶剂的常压沸点是100°C，希望在 20°C 进行样品浓缩，请利用压力-温度曲线求出需减压的真空度是多少？(p44∼p46) 减压降低液面压力→沸点降低→蒸发速度快 5.简述真空冷冻干燥的基本过程？(p50) 6.常用离心技术有哪两种？(p29∼p33) 差速离心、密度梯度离心。 7.简述差速离心的基本概念。(p29) 8.掌握差速离心参数的计算方法: (1)查表法(根据离心半径、转速及相对离心力换算关系图表) 。 如文献上给出了某厂家某型号转头的RCF 、转速及离心半径三个条件中的两个，则可在图表上查出另 一参数；再根据现有使用仪器转头的两个参数(如半径及RCF), 决定另一参数值。 (2)计算法 在离心机厂家提供的转头手册或相关资料上详细提供有转速(rpm)、RCF 、K 值、Rmax、Rmin 等参数，利 用这些参数可使离心参数计算变为简单，且可提高离心效率： 1 ①在已知RCF 及离心时间的情况，计算改用转头所需的时间： t × RCF = t × RCF 1 1 2 2 t = t × RCF /RCF 2 1 1 2 t : 改用转头所需时间, RCF ：改用转头的RCF 2 2 t : 文献给定的离心时间, RCF ：文献给定的RCF 1 1 ②利用K 因数 K 因数值(K-Factor)反映离心转头的效率(通常K 值为10～1000 或更大) ，与转头大小、材质和速度有 关： 2 .53 ×1011 Ln ( R max / R min ) K ( RPM )2 从上式可得出，在样品的S，转头的Rmax 、Rmin 不变时: K 值越小，颗粒沉降所需时间越短，转头使 用效率越高。 各生产厂在出厂的转头上已标刻有最大转速时的K 值，由此可求得低速时的K 值。 利用K 值可估算一定沉降系数(S)颗粒的沉降时间： S = K/t 或 t = K/S 但厂家或文献给出的K 值均是从离心管腔顶部计算而来的，不是从实际液面计算，故实际K 值比理论 K 值要小；实际工作中，可根据盛装样品的实际液面来计算K 值会更节省时间。 两个不同K 值的转头，离心时间的转换，可用公式： T = T × K /K 2 1 1 2 9.长期使用超低温冰箱，要定期进行的是哪两项保养措施？(p66) 除霜、除尘。 第3 章 1.细胞培养的必要条件是什么？(p69∼p71) 2.在CO 培养箱中，CO 的主要作用是什么？CO 调节培养基pH 的化学反应式。