突变试验.pptVIP

* 环境污染物致突变作用及其评价 化学致突变物的检测 教学目的与要求 2. 怎样进行化学致突变物检测？ 1. 如何进行致突变试验的选择？ 一、遗传学终点和试验配套 遗传学终点 （Genetic end point） 试验观察到的现象所反映的事件。 突变发生过程中的事件及遗传学终点的关系 化学物 接触 细胞屏障 DNA损伤 无误修复 未修复 修复错误 DNA完 整性改变 DNA 交换重排 基因 突变 染色体 结构异常 染色体 数目异常 遗传学终点 正常细胞 1* 表示主要反映的终点，2* 表示次要反映的终点 常见致突变试验反映的遗传学终点 ? 试 验 DNA完整性改变 DNA交换或重排 基因 突变 染色体 结构 异常 染色体 数目 异常 微核 ? ? ? 1* 2* 细菌回复突变 ? ? 1* ? ? 姐妹染色单体交换 ? 2* ? 1* ? 细菌DNA修复 1* ? ? ? ? 2. 试验配套 ● 细菌DNA修复试验（DNA完整性改变） 配套原则： 遗传学终点齐全 配套方案: ● 微核试验 （染色体结构异常和数目异常） ● 姐妹染色单体交换试验 （DNA交换或重排） ● 细菌回复突变试验 （基因突变） 二、重要的致突变试验 （四）细菌DNA修复试验 （一）微核试验 （二）姐妹染色单体交换试验 （三）细菌回复突变试验 （一） 微核试验 （Micronuclei test） ★ 试验原理 ★ 试验设计 以染色体结构异常和数目异常为遗传学终点，考察化学物对遗传物质的损伤效应。 微核试验原理图 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 ★ 实际案例分析 利用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验检测大气污染物SO2的致突变性。 ★ 试验方法的确立 嗜多染红细胞及其微核实例 断颈处死取股骨 取骨髓细胞制涂片 涂片固定染色 镜检：嗜多染红细胞，计数微核率 试验流程图 吸入SO2 染毒 吸入洁净空气