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sa1tnf1! 融合蛋白高效表达、纯化及复性研究 - 南方医科大学学报
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?????????????????????????????????????????????????????南方医科大学学报I[?B8M@?QK‘?W:4aH??????????????????????????????????????????????????????$$’f’I*H
B+CDEFC! 融合蛋白高效表达纯化及复性研究
徐翠香!胡志明!李金龙!高基民 南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所!广东广州
G 0/$0/0H
摘要 目的 研究链亲和素标记的人肿瘤坏死因子 融合蛋白的纯化 复性方法 并研究其生物学功能 方法
! !IB+CDEFC!H ( )
# $
层析柱进行纯化 分
在大肠杆菌中表达 B+CDEFC! 融合蛋白 对表达的 B+CDEFC! 融合蛋白采用镍金属螯合 E4CED+
别在尿素体系和盐酸胍体系中复性 对其进行鉴定* 法检测 融合蛋白对 细胞的杀伤活
JKLMKN:OP5M QDD B+CDEFC! R’’
流式细胞仪分析 融合蛋白对生物素化的 细胞锚定修饰率 结果 融合蛋白在大肠杆菌中
性 B+CDEFC! QS-’ * B+CDEFC!
# $层析柱纯化的
实现了高效表达 表达的目标蛋白占菌体蛋白 *$T以上 镍金属螯合 E4CED+ B+CDEFC! 融合蛋白纯度达
’
经过两种体系复性形成的 融合蛋白的二聚体和多聚体均具有双功能活性 既对 细胞有杀伤活
到’0=(T B+CDEFC! R’’
细胞 锚定修饰率大于 结论 初步建立了 融合蛋白制备工艺
性又能锚定修饰生物素化的 *
QS-’ ’$T B+CDEFC! B+C!
二聚
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