牛血清白蛋白泡沫法提取庆大霉素产物快速检测方法的研究 - 消泡剂.pdfVIP

畜牧与饲料科学 AnimalHusbandrynadFeedScience 2009，30(6)：30,31 牛血清白蛋白泡沫法提取庆大霉素产物快速检测方法的研究 任 健 一，童应凯 ，吴兆亮 ，李华祥 。 (1．天津农学院，天津 300384；2．河北_丁业大学，天津 300130；3．江南大学 ，江苏 无锡 214122) 摘要：采用醋酸纤维薄膜电泳法分离庆大霉素与牛血清白蛋白．再用紫外分光光度法测定蛋白质泡沫法提取庆大霉素 含量的方法。该方法中，选择 620nm作定量峰 ，庆大霉素和氨基黑 10B的结合物浓度在 1．25-10~g／mL范围内，吸收度 与浓度的线性关系良好 ，相关 系数 为0．9996，回收率为 100．59％。 关键词：庆大霉素 ；泡沫提取 ：快速检测 中图分类号 ：0658；R978．12 文献标识码：A 文章顺序编号 ：1672—5190(2009)06—0030—一D2 ResearchonDetectionofExtractionofGentamicinSulfatebyBovineSerum Albumin-based Foam Separation RENJian一，TONGYing—kai，WUZhao—liang2，LIHua—xiang。 (1．TianjinAgriculturalUniversity，Tianjin 300384，China；2．HebeiUniversityofTechnology，Tianjin 300130，China；3．Jiangnan University，Wuxi 214122，China) Abstract：In thispaper，celluloseacetate electrophoresisand UV spectrophotometry wereused todetermineGentamicin infoam extractedbyBSA．InUV spectrophotometrymethod，620 nm wasselectedasacriterionforquantitativedetermination．Theresults indicatedthatthereisabetterlinearrelationshipbetweentheabsorbanceandtheconcentrationofthesamplewiththeconditionthat comboconcentrationofgentamicinandaminoblack10Bwas1．25to10txg／mL，thecorrelationcoefficientwas0．9996，andthemean rateofrecoverywas100．59％． Keywords：Gentamicin；ofamextract；rapiddetection 庆大霉素是碱性水溶的氨基糖苷类抗生素．常用离子 妥 、巴比妥钠 、95％乙醇、冰乙酸 、氯化钠 、氢氧化钠等均为 交换法提取效率不高。严希康等…用十二烷基硫酸钠 (SDS) 分析纯。 泡沫提取庆大霉素，回收率为 73％。同时需加入对人体有 泡沫液 ：在待提取 的庆大霉素 中加入终浓度为 4OO 害的烷基醇聚氧乙烯醚 (AEO29)以抑制沉淀产生。王丰莉_2l Ixg／mL的BSA和0．5mol／LNaC1，调节 pH值为 8．0，在气速 等用牛血清 白蛋 白(BSA)泡沫提取庆大霉素 ，直接将 回收 15mL／min收集分离 的泡沫液 [1]。电极缓冲液 、染色液、漂洗 的泡沫液做抑菌圈效价测定，回收率是 80．2％。生物表面活 液配制方法见文献 3『]。 性剂BSA不易与庆大霉素络合成沉淀 且无机盐的存在能 1．2 试验方法 改变BSA的表面张力，改善鼓泡性能，可提高回收率。该方 1．2．1 薄膜 电泳分离庆大霉素与牛血清 白蛋 白：取用 电极 法高效 、无毒，是一种理想的提取方案，但抑菌圈检测周期 缓冲液浸泡好的醋酸纤维薄膜 ，