红细胞血型系统稀有血型高通量基因筛选方法的建立 - 浙江省血液中心.DOC

2015年浙江省科技进步奖推荐成果公示表 项目名称 红细胞血型系统稀有血型高通量基因筛选方法的建立及其应用 推荐单位 浙江省卫生与计划生育委员会 主要完成单位 浙江省血液中心 主要完成人员 洪小珍、朱发明、许先国、陈舒、应燕玲、兰小飞、马开荣 一、项目简介 红细胞血型系统在输血医学、器官移植、法医学诊断等方面具有重要意义，红细胞血型基因诊断和血型分子机制检测是输血领域中的研究热点。本项目针对热点问题，建立了ABO、RhD、H、MNSs、Duffy、Dombrock、colton、scianna、diego、kidd、kell、Landsteiner-Wiener、Lutheran、Yt红细胞血型系统测序分型方法，并利用SNPaShot建立了高通量技术同步检测MNSs、Duffy、Dombrock、colton、scianna、diego、kidd、kell、Landsteiner-Wiener、Lutheran、Yt系统等位基因，获取献血人群红细胞血型系统遗传数据和稀有等位基因数据，筛选出了合适的基因型标准品。大样本获取ABO血型分布、ABO亚型发现ABO血型新等位基因，得到WHO命名和认可。首次进行中国汉族人群A2表型的研究，发现A2表达的不平衡，明确了中国人群A2表型的分子机制，发现8种A2等位基因。综合采用流式技术、染色体分析、STR和基因分型技术，明确发现1例ABO血型嵌合个体，首次揭示了其形成的分子机制。在国内首次进行p、Pk表型的分子机制研究，明确2例p表型和1例Pk表型的分子机制，对其家系进行调查研究。系统明确了α1,2岩藻糖基转移酶基因（FUT1）突变点对H血型抗原表达的影响，发现35CT、235GC、293CT、658CT、682AG、547-552缺失AG、35CT+682AG和35CT+235GC+682AG突变点并不影响FUT1 mRNA转录水平，其蛋白生成量和空间结构正常，但突变后酶活性均下降，而单独35CT突变并不影响H抗原的生成。已发表论文27篇，获得发明专利1项。 项目建立红细胞血型基因诊断和血型分子机制检测的一系列关键技术，以及献血人群意外抗体筛选和确认技术平台，已在省内进行推广应用。有关技术已为多家临床医院疑难标本的确认提供证据，稀有表型的冰冻血液已应用于临床，及时挽救了患者生命，产生了良好的社会效益。项目成果密切联系实际工作，实用性强，有效解决了红细胞免疫因素引起的疑难配血，降低了免疫风险，提升了稀有血型血液应急保障能力、血液安全和人民的生活水平。 二、主要完成人及技术贡献（包括：姓名、排名、技术职称、工作单位、对本项目技术创造性贡献、曾获国家、省科技奖励情况） 姓名 排名 技术职称 工作单位 对本项目技术创造性贡献 曾获国家、省科技奖励情况 洪小珍 1 主任技师 浙江省血液中心 项目组织，ABO、A4GALT、B3GALNT1基因测序分析 无 朱发明 2 主任技师 浙江省血液中心 FUT1突变点对H血型抗原表达 浙江省科学技术奖二等奖1项，三等奖8项 许先国 3 主任技师 浙江省血液中心 红细胞血型系统测序分型方法建立及其应用 浙江省科学技术奖二等奖1项，三等奖2项 陈舒 4 副主任技师 浙江省血液中心 SNPaShot、ABO血型分型 无 应燕玲 5 主管技师 浙江省血液中心 A2研究和SNPaShot 浙江省科技进步奖三等奖1项 兰小飞 6 主管技师 浙江省血液中心 稀有表型筛选和确认 无 马开荣 7 主管技师 浙江省血液中心 稀有表型筛选和确认 无 三、主要完成单位及创新推广贡献 主要完成单位为浙江省血液中心，完成单位提供相应的实验场所、设施和设备，所有研究人员来自该单位，并提供相应的人员和技术支持和项目成果的应用推广，项目所有创新点在该完成单位实施。 四、经济（社会）效益（推荐社会公益类二等奖及以上等级的候选项目需分单位单列，例如：卫生项目要包括在XX医院推广应用病例数，以及产生的社会效益） 推广： 1.项目建立的ABO、RHD、FUT1血型系统基因诊断方法，已为临床医院疑难标本、全省采供血机构的疑难标本提供技术服务，有效准确地鉴定了疑难标本的红细胞血型，有效提升了患者血型鉴定能力，保证了检测结果的准确性。 2.项目建立的高通量筛选JK（a-b-）、类孟买型、ABO血型亚型和RhD血型变异体、意外抗体的技术平台，已在省血液中心进行广泛应用，成功筛选出多个红细胞血型系统的稀有表型献血者，并应用冰冻流程和方法保存罕见表型血液，有效保障全省罕见表型患者的临床急救用血，提升了其血液应急能力，保证了血液安全，产生了良好的社会效益。 3.项目建立SNPaShot技术多重高通量同步检测红细胞系统等位基因方法，已应用于省血液中心建立的红细胞血型系统稀有表型基因数据库，为红细胞血型