IGF-Ⅰ、TNF-α对去子宫大鼠卵巢颗粒细胞及E-%2c2-、P分泌影响的研究.pdfVIP

lGF—I、TNF—q对去子宫大鼠卵巢 颗粒细胞及E：、P分泌影响的研究 (摘要) 目的本研究旨在探讨细胞因了IGF—I、TNF—Q对去予富大鼠卵巢 颗粒细胞增殖、凋亡及E。、P分泌的影响。 方法 和TNF一Ⅱ组，每组5只)，手术切除子宫，保留敬侧卵巢。其余5只作为 正常对照组行假手术。全部大鼠均在相同条件下喂养3个月。 2。卵巢颗粒细胞培养：3个月后，经阴道涂片确定动情周期。当大 鼠处于发情前期时将其处死。取发育中卵泡的颗粒细胞进行原代细胞 培养。使用含10％FBS的DMEM培养基，将Gcs浓度调至实验所需，接 种于多孔培养板，置37。C、5％cO：培养箱中孵育。24h后，在所分的 (60ng／m1)，继续培养5天。 3．关于细胞增殖：3．1应用四唑盐比色法(MTT法)观察细胞增殖； 3．2应用彩色图像分析系统比较各组细胞形态学特征。 4．关于细胞调亡：4．1流式细胞仪测定各组细胞凋亡率(碘化丙啶 染色)；4．2荧光显微镜观察各组细胞凋r：情况(吖啶橙染色)；4．3彩 色图像分析系统比较各组细胞形态学特征(HE染色)。 5．关于卵巢E。、P：每日换液时收集上清液，冷冻干燥后，一400C低 温冰箱保存。放射免疫方法测定E。、P。 结果 1．卵巢颗粒细胞增殖形态学及增殖率的变化：模型组较正常组增 殖降低；IGF—I组较模型组增殖降低减缓，存在剂量一效应关系(1．2～ 120ng／m1)；而TNF一Ⅱ组(60ng／m1)较模型组增殖降低加剧。 2．卵巢颗粒细胞凋亡形态学及凋亡率的变化： 模型组较正常组凋 亡升高：IGF I组较模型组凋亡升高减缓；而TNF-a组较模型组凋I’： 升高加剧。 3．卵巢E。、P的变化：模型组较正常组E。、P降低；IGF—I组较模 Ⅱ纽较模型组E。、P降低加剧。 结论 1．子宫切除后，大鼠卵巢颗粒细胞增殖减低，凋广增加，E。、P水 平降低。 2．外源性IGF—I促进去子宫大鼠卵巢颗粒细胞增殖，抑制细胞凋 亡，抑制E。、P水甲降低。 3．外源性TNF—Q抑制去子宫大鼠卵巢颗粒细胞增殖，促进细胞凋 亡，促进E。、P水平降低。 关键词 胰岛素样牛．长因子一I；肿瘤坏死因子一Ⅱ；去子宫；增殖；凋r：； 雌二醇；孕酮；人鼠 The OfIGF．I、TNF-a’SInfluenceonProliferationand Study Cellsand ofRatswith of Granulosa E2、P Ovary Apoptosis Hysterectomy (Abstract) objectives IGF—I、TNF—a’SinfluenceOil The studied proliferation investigation with cellsand ofrats and granulosaE2、P hysterectomy． ofovary apoptosis Methods adultfemale ratswereused I．Animal：Thirty-fiveSprague—Dawley forsix inthe ratswereselectedgroups(modelgroup、 experiment．Thirty IGF．I1 2