实时荧光定量T-PCR测定不同分期膝骨关节炎滑膜COX-2mRNA的表达.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………．1 英文摘要．．…………．．．……………………．3 引 言。。…………．．。．．．……．．……．．5 正 文………………………………………7 1材料与方法………………………………………7 1．1主要仪器…………………………．……．．7 1．2主要试剂………………………………………．．7 1．3诊断及分组……………………………………7 2实验方法………………………………………：8 2．1FLS细胞培养………………………………．．8 2．2 O FLS细胞，总RNA提取…………………………．．1 O 2．3逆转录反应…………………………………．1 1 2．4实时荧光定量RT-PCR……………………………1 2 2．5统计学方法．．……．．．．．．．．．．…．．．．．．．．．．1 2 3结果………………………………………．1 8 4讨论………………………………………．．1 1 5存在问题及展望…．……．…．．。…………．2 结 论…………………………………………．22 3 参考文献……………………………………．．2 综 述．．．…………．．．．．．………．．．．．．．．．26 致 谢．．．一…．……．．．．．……．．………．．34 5 攻读学位期间发表的学术论文目录…………………．．3 作者声明………，……………………………，．36 7 个人简历……………………………………．．3 中文摘要 目 的：检测不同分级OA患者成纤维样滑膜细胞中COX-2mRNA的表 达水平的差异，为进一步研究COX-2炎症途径在0A发生、发展的作 用提供可靠的理论依据。 方 法：收集收集膝骨关节炎患者病变滑膜44例(根据Kel lgren I一Ⅱ级1 和Lawrence的x线诊断标准： 5例；Ill级14例；IV级15 例)，以及非膝骨关节炎关节滑膜12例(单纯半月板损伤、前交叉韧 带损伤、外伤)；(1)成纤维样滑膜细胞原代培养至四代的成纤维样 平。所用资料应用SPSSl8．o统计软件进行统计学分析，以a=0．05 作为检验标准。 结果：(1)COX一2mRNA在所有的膝关节成纤维样滑膜细胞中都能检 o 比较差异无统计学意义(尸0．05 结 论：(1)人膝关节成纤维样滑膜细胞均存在COX一2mRNA，并可 骨性关节炎患者膝关节成纤维样滑膜细胞表达水平最高；中、晚期表 达水平相当，与骨关节炎分期不成正负关系；COX-2mRNA可能是骨关 节炎炎症途径的发生、发展过程中的一个潜在的启动因子，且主要起 作用于