间歇性负压培养对人BMSCs骨保护素和骨保护素配体mRNA表达水平的影响.pdfVIP

- 1354 · ChineseJournalofReparativeandReconstructiveSurgery November2008，Vo1．22，No．11 , 间歇性负压培养对人BMSCs骨保护素和 骨保护素配体mRNA表达水平的影响 杨治 张银刚 刘淼 郭雄 许鹏。 【摘 要】 目的 探讨问歇性负压对体外培养的人BMSCs骨保护~．．(osteoprotegerin，OPG)mRNA和骨保护素 配体 (osteoprotegerinligand，OPGL)mRNA表达水平的影响。 方法 2008年 1月由2例髋关节骨性关节炎行人工关 节置换患者 自愿捐赠骨髓，分离并体外培养人BMSCs，取第3代细胞。实验组进行负压诱导，设置压力为5OlP【a，30mird 次，2次 ／d，间歇性负压干预2周；对照组于普通CO2培养箱中常规培养。倒置相差显微镜下观察细胞形态，并通过实时 定量PCR检测OPGmRNA和OPGLmRNA表达水平。 结果 实验组细胞增殖速度略低于对照组，细胞逐渐由梭形向 多角形转变，有数个突起，数 目和形态不定，10～ 14d细胞融合成单层，2周后逐渐形成多个散在致密岛状结构；对照组细 胞大部分为梭形。问歇性负压培养2周后，与对照组比较，实验组细胞OPGmRNA表达水平显著提高，OPGLmRNA表 达水平显著降低，0PGLmRNA与OPGmRNA比率显著下降，差异均有统计学意义 (P0．01)。 结论 间歇性负压促 进人BMSCsOPG表达，同时抑制其 OPGL表达。 【关键词】 问歇性负压 BMSCs 骨保护素 骨保护素配体 中图分类号：R684 R687 文献标志码：A EFFECTSOFINTERMn．1IENTNEGATIVEPRESSUREON mRNA EXPRESSlON OF0STEOPROTEGERINAND OSTEOPROTEGERINLIGANDINHUMANBMSCs／YANGZhi，ZHANGYinganf，LIUMiao，GUOXionf，XUPend． DepartmentofOrthopaedics,theFirstAffiliatedHospitalofMedicalSchool,2KeyLaboratoryofEnvironmentandGenesRelated幻 DiseasesofMinistryo}EducationInstituteofEnvironmentalandEndemicDiseases,jSchoolofMaterialsScienceandEngineering,Xian fiaotongUniversity,Xi’anShaanxi,710061，P．R．China．Correspondingauthor：ZHANGYingan~E—mail：zyingang@mail．xjtu．edu．cn 【Abstract] Objective ToinvestigatetheeffectsofintermittentnegativepressureonthemRNAexpressionof 0steoProtegerin(OPG)and0steopr0tegerinligand(OPGL)inhumanBMSCsculturedinvitro．Methods BMSCswere isolatedfrom adultmarrowdonatedby2hiposteoarthritispatientswithprostheticreplacementinJanuary2008andcultured invitro．Thethirdpassagecellsweredividedintoexperimentalgroupandcontrolgroup．Theexperimentalgroupwasinduced bynegativepressureintermittentlyfor2wee