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2017-07-21 发布于浙江
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仙客来愈伤组织的超低温保存.pdf

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仙客来愈伤组织的超低温保存

生物工程学报 Chin J Biotech 2008, March 25; 24(3): 504-508 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn © 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究简报 1,2 2 2 1 2 卞福花 , 龚雪琴 , 由翠荣 , 郑彩霞 , 曲复宁 1 , 100083 2 , 264005 : 为了避免连续继代造成仙客来愈伤组织的变异, 对仙客来愈伤组织进行了超低温冷冻保存研究。以继代后处于对数生长期的愈伤组织为实验材料, 首先在含有不同蔗糖浓度的培养基上预培养不同时间, 转至不同的冰冻保护剂中 o o 直接液氮冷冻或−20 C 预冷冻2 h, 然后液氮超冷冻保存, 37 C 水浴迅速解冻, 并用相应蔗糖浓度的液体培养基洗涤, 以中性红染色测定细胞的存活率, SPSS13.0 软件进行统计学分析。结果表明: 预培养基中蔗糖浓度、预培养时间、降温方式、冷冻保护剂等对解冻后材料相对存活率存在不同程度的影响, 筛选出4%蔗糖浓度预培养3 d 、9 号保护剂、0oC 停留30 min 后直接冷冻为超低温保存的最佳方案, 通过简单的方法获得了较好的愈伤组织保存效果。 : 仙客来, 愈伤组织, 低温保存, 存活率 Cryopreservation of Cyclamen persicum Mill. Callus 1,2 2 2 1 2 Fuhua Bian , Xueqin Gong , Cuirong You , Caixia Zheng , and Funing Qu 1 College of Life Science and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China 2 College of Chemistry and Biology Technology, Yantai University, Yantai 264005, China Abstract: In this paper we studied cryopreservation of Cyclamen persicum Mill. callus to avoid variations produced by sub-culture. The callus in the logarithmic phase after sub-culture were used for experiments. Firstly, the callus were pre-cultured in cul- ture-medium containing 4%, 6% or 8% sucrose for different time periods, transferred to different cry