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FL0905萃取3

影响反胶团结构的其他因素 1.有机溶剂的影响:有机溶剂的种类影响反胶团的大小,从而影响水增溶的能力。 2.助表面活性剂的影响:当使用阳离子表面活性剂时,引入助表面活性剂,能够增进有机相的溶解容量,这多半是由于胶团尺寸增加而产生的。 3.温度的影响:温度的变化对反胶团系统中的物理化学性质有激烈的影响,增加温度能够增加蛋白质在有机相的溶解度,例如增加温度可使α-胰凝乳蛋白酶进入NH4-氯仿相并在转移率上分别增加50%。 * 应用 * 完 * 胶团及反胶团结构图 * 2、液膜萃取过程及应用 * 第六节 反胶团萃取 (Reversed Micelles Extraction ) * 发展背景 随着基因工程和细胞工程的发展,尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生产中广泛应用,并显示出优良的分离性能,但它却难以应用于蛋白质的提取和分离。其主要原因有两个:一是被分离对象-蛋白质等在40-50℃便不稳定,开始变性,而且绝大多数蛋白质都不溶于有机溶剂,若使蛋白质与有机溶剂接触,也会引起蛋白质的变性;二是萃取剂问题,蛋白质分子表面带有许多电荷,普通的离子缔合型萃取剂很难奏效。因此研究和开发易于工业化的、高效的生化物质分离方法己成为当务之急。反胶团萃取法就是在这一背景下发展起来的一种新型分离技术。 * 两个原因 一是被分离对象——蛋白质等在40-50℃便不稳定,开始变性,而且绝大多数蛋白质都不溶于有机溶剂,若使蛋白质与有机溶剂接触,也会引起蛋白质的变性; 二是萃取剂问题,蛋白质分子表面带有许多电荷,普通的离子缔合型萃取剂很难奏效。 因此研究和开发易于工业化的、高效的生化物质分离方法己成为当务之急。反胶团萃取法就是在这一背景下发展起来的一种新型分离技术。 * 优点 从所得结果来看,反胶团萃取具有成本低、溶剂可反复使用、萃取率和反萃取率都很高等突出的优点。此外,反胶团萃取还有可能解决外源蛋白的降解,即蛋白质(胞内酶)在非细胞环境中迅速失活的问题,而且由于构成反胶团的表面活性剂往往具有溶解细胞的能力,因此可用于直接从整细胞中提取蛋白质和酶。可见,反胶团萃取技术为蛋白质的分离提取开辟了一条具有工业开发前景的新途径。 * 一、什么是反胶团 是表面活性剂在非极性有机溶剂中亲水性基团自发地向内聚集而成的,内含微小水滴的,空间尺度仅为纳米级的集合体。是一种自我组织和排列而成的,并具有热力学稳定的有序构造。 所以表面活性剂是反胶团溶液形成的关键 * 构成反胶团的表面活性剂种类 (1)阴离子表面活性剂 AOT(2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠 ) (2)阳离子表面活性剂 季铵盐 * 两个特异性功能 (1)具有分子识别并允许选择性透过的半透膜的功能; (2)在疏水性环境中具有使亲水性大分子如蛋白质等保持活性的功能。 因此,有很好的应用前景。 * 二、反胶团的形成 一、临界胶团浓度(Critical Micelle Concentration,CMC) 临界胶团浓度,是胶团形成时所需表面活性剂的最低浓度,用CMC来表示。 这是体系特性,与表面活性剂的化学结构、溶剂、温度和压力等因素有关。CMC的数值可通过测定各种物理性质的突变(如表面张力、渗透压等)来确定。由于实验方法不同,所得的CMC值往往难于完全一致,但是突变点总是落在一个很窄的浓度范围内,故用CMC范围来表示更为方便。 * 胶团与反放团的形成 (1)胶团:将表面活性剂溶于水中,当其浓度超过临界胶团浓度(CMC)时,表面活性剂就会在水溶液中聚集在一起而形成聚集体,在通常情况下,这种聚集体是水溶液中的胶团,称为正常胶团(normal micelle)。结构示意见图a; 在胶团中,表面活性剂的排列方向是极性基团在外,与水接触,非极性基团在内,形成一个非极性的核心、在此核心可以溶解非极性物质。 * (2)反胶团 将表面活性剂溶于非极性的有机溶剂中,并使其浓度超过临界胶团浓度(CMC),便会在有机溶剂内形成聚集体,这种聚集体称为反胶团,其结构示意见图b。 在反胶团中,表面活性剂的非极性基团在外与非极性的有机溶剂接触,而极性基团则排列在内形成一个极性核(po1ar core)。 * 极性核 极性核具有溶解极性物质的能力,极性核溶解水后,就形成了“水池”(water pool)。 当含有此种反胶团的有机溶剂与蛋白质的水溶液接触后,蛋白质及其他亲水物质能够通过螯合作用进入此“水池”。由于周围水层和极性基团的保护,保持了蛋白质的天然构型,不会造成失活。蛋白质的溶解过程和溶解后的情况示意于图b中。 反胶团的大小与溶剂和表面活性剂的种类与浓度、温度、离子强度等因素有关,一般为5-20nm。 * 反胶团的制备 制备反胶团系统三种方法: (1)注入法:将含有pr的水溶液直接注入到含

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