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中药提取物抗菌防腐

LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO LOGO * . Contents 小组成员 组长:莫达康 组员:温影珍 陈宏伟 袁浩彬 黄伟华 指导老师:鲍波 许碧莲 * . Contents 研究目的 添加食品防腐剂 益于人体健康,有一定的营养价值, 消费者认可度高 天然防腐剂 化学防腐剂 民以食为天,食以安为先。近年来食品安全问题一次又一次的进入公众的视野,其中食品安全又以食品腐败问题尤为严重,全世界农副产品、果蔬等食品因腐烂变质而引起的经济损失十分巨大。所以延长保存期限、 防止食品腐败变质是食品工业的重要任务。 传统方法如干制、 盐腌、加热、罐藏 冷冻干燥、气调贮藏 辐射保藏、微波杀菌 工艺程序复杂 耗能大、投资成本高 价格低廉,但若超过安全剂量存在致癌性、 致畸性、易引起食物中毒等问题 * . Contents 研究目的及现状 市面上使用的防腐剂大多是化学防腐剂,对人体有不同程度的危害。因此,天然防腐剂的研发拥有巨大的前景。其中中药防腐剂益于健康,性质稳定,可作为天然防腐剂的首选。 但是目前对中药防腐剂的基础研究缺乏,对中药防腐剂的开发缺乏系统的理论指导,研究成效并不显著。 此番研究的目的就是在广谱、高效、低毒的抗菌中草药中,找出抗致病菌功效显著的中药,为制成有效的重要防腐剂提供理论基础。 * . Contents 研究内容 1.比较八种中药提取物体外抗三种食物腐败菌的能力,选择抗菌效果最好的一种中药进行下一步研究。 2.研究1中所选中药提取物在不同浓度下的抑菌效果及该中药的MIC。 * . Contents 实验选材 中草药的选取 八种具有广谱、高效、低毒的抗菌中药: 五倍子、白花蛇舌草、金银花、肉桂、黄连、罗汉果、栀子、鱼腥草 细菌的选取 中国食品微生物限量规定不得含有的致病致腐菌: 沙门氏菌、志贺菌、金色葡萄球菌 * . Contents 实验步骤 中药药液的提取(水提煎煮法) 各取50g进行粗粉碎后, 通过球磨机再进行球磨, 过筛得到各中草药的细粉碎样品。取粉碎后中药各50g,分别加水500ml,将中药浸泡在水中,加热至沸腾,改用文火加热20分钟,将滤液滤出,在将滤渣加水至200ml,二次煎煮,后将两次煎煮所得滤液加在一起,水浴浓缩至100ml,高压灭菌后放凉至室温,备用。所得中药水煎煮液浓度为0.5g/ml。 * . Contents 实验步骤 二、菌种的活化 将保存在低温下的菌种取出,置于摇床中, 在各菌种适宜条件下进行活化,后将活化菌置于冰箱中冷藏保存备用。 * . Contents 实验步骤 三、药敏试验 用无菌棉拭子取菌液涂布在以打孔的90MM直径的MH药敏平板上,每平板打4个孔,待干后,分别加入中药水煎液50UL。在培养箱中37摄氏度培养24小时后,用游标卡尺量取抑菌环直径。利用琼脂扩散法,分别取浓度为 10^6cf u /mL 的菌液各 0.2mL , 分别加入 LB 琼脂培养基中 ,凝固后用无菌打孔器在琼脂培养基上打孔。 将各中药提取物加入孔中每组分别做三个平行实验; 另外做两组对照实验,在一个平皿中加入蒸馏水作CK;在另一个平皿中加入浓度为3.4mg/ml苯甲酸钠作CK- 。然后再将平皿置于37℃恒温箱中培养, 24h后取出观察。用卡尺十字交叉法测量抑菌圈直径,计算抑制生长率。 抑制生长率= 处理净生长量/CK- 净生长量×100% * . Contents 实验步骤 中草药水提物 显著性 P0.05 P0.01 抑菌圈直径(cm) 五倍子 白花蛇舌草 金银花 肉桂 黄连 栀子 鱼腥草 罗汉果 苯甲酸钠 蒸馏水 沙门氏菌 志贺氏菌 金黄色葡萄球菌 八种中草药水提物抗菌谱(抑菌环) * . Contents 实验步骤 四、不同浓度的中草药提取物抑菌效果 选取各细菌抑菌生长率最高的一种中药水提物,分别设置提取物浓度分别为: 重复上一步做药敏实验。 0.5g/ml,0.25g/ml,0.125g/ml,0.0625g/ml,0.0313g/ml * . Contents 实验步骤 不同浓度中草药对目标细菌的抑菌生长率 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.0313 中药 目标细菌 抑菌环直径 抑菌生长率 金黄色 葡萄球菌 浓度(g/ml) 志贺氏菌 沙门氏菌 抑菌环直径 抑菌生长

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