因素对微生物.ppt

试验12 化学因素对微生物的影响 * . 目的： 了解环境因素对M生长的影响 掌握石碳酸系数的测定方法 * 材料 菌种：E.c 抗生素：青霉素，罗红霉素，红霉素，氯霉素 5%石碳酸（苯酚），0.25%新洁而灭 牛肉膏蛋白胨培养基 * 抗生素杀（抑）菌作用观察 牛肉膏蛋白胨培养基平板 记号笔划区 取100ul菌液涂布 在相应区域加入抗生素纸片，注意交叉污染 37oC培养 * 三、消毒剂、防腐剂和治疗剂 （一）消毒剂和防腐剂 消毒剂:可以抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生有害作用的化学试剂.—主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和环境中的微生物。 防腐剂:可以抑制或阻止微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学药剂.——用于机体表面，如皮肤、粘膜、伤口等处防止感染，也有的用于食品、饮料药品的防腐作用。 ☆但现时消毒剂和防腐剂间的界限已并不很严格. 消毒防腐剂的作用机理一般有下列三种方式: ①使微生物蛋白质凝固变性,发生沉淀.如酒精等. ②破坏菌体的酶系统,影响菌体代谢.如过氧化氢等. ③降低微生物表面张力,增加细胞膜的通透性,使细胞发生破裂或溶解.如来苏儿等酚类物质. * 常用的消毒防腐剂及其应用 类型 名称及使用方法 作用原理 应用范围 醇类 70%—75%乙醇 脱水、蛋白质变性 皮肤、器皿 醛类 0.5%—10%甲醛 2%戊二醛（pH=8） 蛋白质变性 房间、物品消毒（不适合食品厂） 酚类 3%—5%石炭酸 2%来苏儿 3%—5%来苏儿 破坏细胞膜、蛋白质变性 地面、器具 皮肤 地面、器具 氧化剂 0.1%高锰酸钾 3%过氧化氢 0.2%—0.5%过氧乙酸 氧化蛋白质活性基团，酶失活 皮肤、水果、蔬菜 皮肤、物品表面 水果、蔬菜、塑料等 * 类型 名称及使用方法 作用原理 应用范围 重 金 属 盐 类 0.05%—0.1%升汞 2%红汞 0.1%—1%硝酸银 0.1%—0.5%硫酸铜 蛋白质变性、酶失活 变性、沉淀蛋白 蛋白质变性、酶失活 非金属器皿 皮肤、粘膜、伤口 皮肤、新生儿眼睛 防治植物病害 表 面 活 性 剂 0.05%—0.1% 新洁尔灭 0.05%—0.1% 杜灭芬 蛋白变性、破坏细胞膜 皮肤、粘膜、器械 皮肤、金属、棉织品、塑料 * 类型 名称及使用方法 作用原理 应用范围 卤素及其 化合物 0.2—0.5mg/L氯气 10%—20%漂白粉 0.5%—1%漂白粉 2.5%碘酒 破坏细胞膜、蛋白质 饮水、游泳池水 地面 水、空气等 皮肤 染料 2%—4%龙胆紫 与蛋白质的羧基结合 皮肤、伤口 酸类 0.1%苯甲酸 0.1%山梨酸 食品防腐 食品防腐 * 效应评价指标： 最低抑制浓度（Minimum Inhibitory Concentration, MIC） 半致死剂量（50％ lethal dose, LD50） 最低致死剂量（Minimum lethal dose, MLD） 石碳酸系数 （phenol coefficient） * 石碳酸系数的测定 以石碳酸作标准来表示杀菌剂实际效价地指数。 R．柯赫（Koch,１88１）最早创造了如下方法：把附有细菌的丝线浸入消毒剂洗涤后，再移入培养基中以确认其死灭情况（德语称该法为Fade－nmethode）。 19０3年莱迪尔（S.Rideal）和沃克（J.T.A.Walker）又试行了下列方法：在把消毒剂分级稀释，然后加入一定量的细菌，每隔五分钟取出，在培养基中进行接种检查，并求出五分钟时生长、十分钟时死灭的稀释倍数，再和用石碳酸进行同样操作所得的值之比，作为石碳酸系数，对消毒效应加以计量化。 例如金黄色葡萄球菌的值即为：升汞175；红汞2０：碘286等。 * 石碳酸系数的测定与计算 消毒剂 稀释倍数 生长状况（+生长，-不生长） 石碳酸系数 5min 10min 15min 5%石碳酸 50 60 70 80 90 0.25% 新洁而灭 150 200 250 300 500 * 思考题 含抗生素的滤纸片周围形成的抑（杀）菌圈表明该区域培养基中的原有细菌被杀死或被抑制而不能生长，你如何用实验证明抑（杀）菌圈的形成是由于抗生素的抑菌作用还是杀菌作用？ 我们都知道医院常用作消毒剂的乙醇浓度是75%，为何不是用100%浓度的，请说明用75%乙醇的原因及机理。 某公司推出一种新型饮料，并声称是100%纯天然产品，不含防腐剂，利用你所掌握的微生物知识，试设计一个简单实验来初步判断此饮料是否含防腐剂。 *