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各种蛋白质原料均是由天然原料加工而成,成分复杂,且因加工方法、原料产地,营养物质的含量也随之变化,对发酵影响较大。 * 有些前体有的是菌体本身能够合成的,有的是菌体本身不能自身合成或者合成量极少,需要外界添加。 * 合成青霉素过程中缬氨酸和半胱氨酸,可以自身合成。 * * * 如何淀粉质量差、难水解、应该适当降低调浆浓度,延长糖化时间,使糖液达到要求。 * DE值 是还原糖(以葡萄糖计)占糖浆干物质的百分比。国家标准中,DE值越高,葡萄糖浆的级别越高。工业上用DE值(也称葡萄糖值)表示淀粉的水解程度或糖化程度。 糖化液中还原性糖全部当作葡萄糖计算,占干物质的百分比称为DE值。 * 直接用于淀粉糖化,淀粉进行糖化时,加入磺化煤粉一起糖化,完成后直接过滤。会阻塞管道及造成阀门破损。 * 相对分子质量越小的底物越难水解,也就是说底物分子的葡萄糖聚合度越低越难水解。 * 温度大于60度时淀粉不易老化 * 酸酶水解 * 消毒不一定达到灭菌的要求,而灭菌可以达到消毒的目的 。 * 将配置好并经预热的培养基用泵持续输入由蒸汽加热的加热塔,使其在短时间内达到灭菌温度,然后进入维持罐,使其在灭菌温度下5-7min再进入冷却管,使其冷却至接种温度并直接进入事先灭菌的发酵罐内。 * * 1. 间歇灭菌的温度变化 过程包括: 升温、保温、冷却 各阶段对灭菌的贡献:20%、75%、5%。 2. 间歇灭菌的工艺操作(了解) (1)灭菌之前,发酵罐的空气分过滤器要进行灭菌、吹干,若已空罐灭菌,则可以省略; (2)预热:向夹套或蛇管中通入蒸汽,间接将培养基加热至70℃左右。作用是利于糊化、减少冷凝水的生成、减轻噪音; (3)开启蒸汽管,向培养基中通入蒸汽,升温。 (4)罐压达1kg/cm2 ( 0.1 MPa)时,安装在发酵罐封头的接种管、补料管、消泡剂管等应排汽。 2. 间歇灭菌的工艺操作 (5)保温:调节好各进汽和排汽阀门,使罐压和温度保持在一稳定水平,维持一定时间。 (6)保温结束后,依次关闭各排汽、进汽阀;待罐内压力降至0.5kg/cm2左右时,向罐内通入无菌空气,向夹套或蛇管中通入冷水,使培养基降至所需温度。 (二)连续灭菌 连续灭菌:将配制好的培养基在向发酵罐等培养基装置运送的同时,进行加热、保温和冷却而进行灭菌。 1. 连续灭菌的温度变化 升温、冷却耗时短,灭菌温度高,缩短保温时间,有利于减少营养物质的破坏 2. 连续灭菌的工艺流程 (1)预热 可用专门的预热罐,也可用配料罐兼作 温度:一般预热至70℃左右 预热的物料用泵泵入连消装置 输料泵:常用 旋涡泵、往复泵、螺杆泵 旋涡泵 往复泵 螺杆泵 (2)加热 物料泵入连消塔,培养基与蒸汽混合,温度迅速上升至130~140℃ 常用连消装置有三类: 套管式连消器 汽液混合式连消器 喷射式加热器 套管式连消塔 上疏下密,45°小孔,孔径6毫米左右 培养液流动线速度小于0.1m/s ; 在管内逗留时间为15~20秒 汽液混合式连消器 1. 喷嘴 2. 吸入口 3. 吸入室 4. 混合喷嘴 5. 混合段 6. 扩大管 喷射加热器 (3)保温 保温设备 (维持设备):保温材料包裹 两种形式:罐式、管式 维持罐 管式维持器 在设计管式维持设备时,须采用停留时间分布的概念,而不能采用单纯的停留时间。 圆管内不同流动形式流体的速度分布情况 湍流 Vaverage = 0.82 Vmax 活塞流 Vaverage = Vmax 粘滞流 Vaverage = 0.5 Vmax (4)冷却 喷淋冷却器 板式冷却器 真空冷却器 喷淋冷却器 结构简单;广泛使用 板式换热器 体积小,换热效率高;但流动阻力较大 板式换热器原理图 板式换热器 板式换热器 2. 连续灭菌的工艺流程 喷射加热——真空冷却连续灭菌系统 连消注意事项 1)连消前,应先进行空罐、维持罐(管)、冷却系统的灭菌; 2)确保管路无渗漏; 3)当培养基含有较大固体颗粒或有较多泡沫时,采用连消容易发生灭菌不彻底。 (三)间歇灭菌与连续灭菌的比较 灭菌方式 优 点 缺 点 连 续 灭 菌 灭菌温度高、减少营养物质损失 设备要求高 操作条件恒定、灭菌质量稳定 操作较麻烦 易于实现管道化和自控操作 染菌机会较多 避免反复加热冷却,提高利用率 不适合含大量固体的物料 发酵设备利用率高 对蒸汽要求高 间 歇 灭 菌 设备要求低 培养基损失成分较多 操作要求低、适宜手工操作 需反复加热和灭菌 适合小批量生产 不适合大规模生产 适
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