分析化学实验实验十三VB 12 吸收光谱的绘制及其注射液的鉴别和.PPT

分析化学实验 实验十三 VB12吸收光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定 实验十三 维生素B12吸收光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定 一 简介 掌握VB12注射液的鉴别方法和含量测定方法，并掌握其原理；熟悉该实验过程中的操作要点和注意事项。 二 实验目的 实验十三 VB12吸收光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定 三 实验指导 实验十三 VB12吸收光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定 吸收曲线绘制的实验原理 三 实验指导 维生素B12是含钴的有机药物，为深红色结晶 利用分光光度计能连续变换波长的性能，可以测绘有紫外-可见吸收溶液的吸收光谱曲线。本实验用维生素B12的水溶液，浓度约100μg/ml，水为空白，绘制紫外-可见光区吸收曲线。 维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰：278±1nm、361±1nm与550±1nm，求出相应的吸光系数，用他们的比值来进行鉴别。 注射液鉴别的实验原理 三 实验指导 VB12注射液在361nm的吸收峰干扰因素少，吸收又最强，《中国药典》(2010年版)规定以361±1nm处吸收峰的比吸光系数 值为测定注射液含量的依据。 三 实验指导 定量测定的实验原理 四 实验内容 实验十三 VB12吸收光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定 四 实验内容 二 注射液的鉴别 精密吸取一定量维生素B12注射液样品，用水稀释至约为25μg/mL，以水为空白，分别在278±1nm、361±1nm与550±1nm波长处，测定吸光度，求： ① E1%1cm361和E1%1cm278的比值 ② E1%1cm361和E1%1cm550的比值 (361nm波长处的吸光度与278nm波长处的吸光度的比值应为1.70~1.88；361nm波长处的吸光度与550nm波长处的吸光度的比值应为3.15~3.45。) 四 实验内容 三 定量测定 鉴别项下在361±1nm波长测得的吸光度为A样，试液中维生 素B12的浓度c(μg/ml)则可按下式计算： cB12(μg/ml)=A样×48.31 根据朗伯-比尔定律：A=Ecl cB12(g/100ml)=A样/(E1%1cm×1)=A样/207 将浓度单位换算成μg/ml得： cB12(μg/ml)=(A样/207) ×(106/100)=A样×48.31 Thank you