逍遥散对兔性激素水平和膝关节软骨细胞凋亡相关基因的影响.pdfVIP

O0002333335 6 3讨 论…………………………………………·1 3．1中医对膝关节骨关节炎的认识…………………………16 9 3．2现代医学对膝关节骨关节炎的认识……………………·-1 3．3实验动物模型的建立………………………………··26 3．4逍遥散与软骨细胞凋亡………………………………27 4不足与展望………………………………………··29 结 论……………………………………………30 参考文献……………………………………………31 附 录…………………………………………··36 综 述…………………………………………··40 致 谢…………………………………………··54 攻读学位期间发表的学术论文目录…··……………………·56 作者声明……………………………………………57 个人简历……………………………………………58 中英文缩略词汇表 中 文 摘 要 目 的：观察逍遥散对雌性兔性激素水平及软骨细胞调控基因bcl．2， bax表达的影响，探讨逍遥散降低兔膝关节软骨细胞凋亡的可能作用机 制，为临床推广应用逍遥散防治骨关节炎提供理论依据。 方 法：6月龄雌性新西兰兔4 制造膝关节骨关节炎模型，术后不固定伤肢，1周后每天驱赶兔子行走两 次，共30min，连续4周。查随机数字表将实验动物随机分为逍遥丸组 (简称中药组)、硫酸氨基葡萄糖组(简称西药组)、逍遥丸合硫酸氨 0只。 基葡萄糖组(简称复合组)、模型对照组(简称对照组)，每组1 表面积折算的等效剂量，中药组按8丸／d／X配置成30ml液体灌胃，连 续给药8周。西药组按2粒／d／只配置成30ml液体灌胃，连续给药8周。 复合组分别给予逍遥丸8丸／d／7,合硫酸氨基葡萄糖2粒／d／只，连续 给药8周。对照组不予任何处理，所有动物同样条件下饲养。造模后第 12周末取材，各组动物耳缘静脉麻醉处死，无菌操作下切开右膝关节腔， 肉眼大体观察关节软骨的颜色、光泽、光滑度等变化情况；血清检测雌 二醇、睾丸酮含量；HE染色、甲苯胺蓝染色，光镜观察膝关节软骨组织 并进行Mankin’s分级评分，比较各组间的差异；然后取内侧胫骨平台软 定。软骨组织切片用TUNEL法(脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺 l-2 口末端标记法)观察软骨细胞凋亡，免疫组织化学法观察软骨细胞bc 和bax的表达。 结 果：1．大体观察：中药组、西药组，复合组与模型对照组比较， 软骨磨损、退变程度明显减轻；光镜下观察，各药物治疗组与模型对照 组比较，Mankin’S评分明显降低，电镜观察发现，各药物治疗组关节软 骨细胞的形态、结构、排列等均优于对照组。2．各组动物性激素含量无 ’ 统计学意义(p0．05)；对照组软骨组织中度损伤，中药组、西药组 和混合组软骨组织轻度损伤，结果比较有统计学意义；3．软骨细胞凋亡 9 0．1 率：中药组(16．92±1．71)、西药组(17．01±1．61)、复合组(1 ±1．28)，三组和对照组(30．19±3．08)比较均较低，尸O．01)；中 药组和西药组组间相比，差异无统计学意义(p0．05)。4．软骨细胞中 6．34±2．26)、 Bcl一2表达的影响：中药组(19．97±1．48)、西药组(1 6．99土2．5 复合组(1