小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、原代培养.doc

分别采用传统与改良方法分离提取小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞 严玉玲，周园红，叶红* (三峡大学第一临床医学院 湖北宜昌443000) 摘要： 目的：建立可靠稳定的小鼠肺泡II上皮细胞（Type II alveolar epithelial cells，AEC II）的分离、原代培养技术，为进一步研究AEC II转分化分泌TGF-β1等物质与乳腺癌休眠细胞激活相关机制奠定基础。方法：通过传统的方法跟改良后方法分别得出提取细胞数量，体现改良方法的优势。结果：使用传统方法每只昆明种鼠可获得(4.18±2.30)×106个，使用改良后的方法每只昆明鼠可获得(1.20±0.2)×107个资料采用SPSS18.0软件分析处理计量资料用±s，独立样本t检验分析组间差异。α=0.05，P＜0.05差异有统计学意义。Isolation and primary culture of Type II alveolar epithelial cells from mice YAN Yu-ling，ZHOU Yuan-hong，YE Hong （First Clinical Medical of China Three Gorges University, YICHANG 443000） Abstract: It is necessary to establish a reliable and stable isolated mouse Type II alveolar epithelial cells(AEC II) lines and the primary culture technology for further studying the mechanism of trans-differentiation of AEC II to secret TGF-β1 and other substances associated with breast cancer dormant cell activation mechanism.Here,we compare the number of cells of conventional methods and improved methods to reflect the advantages of improved methods .The results: Using conventional methods, can be obtained from each mouse AEC II(4.18±2.30)×106;The achieved improved method can be obtained (1.20±0.2)×107.We use the ±s to be the measurement data and there have a statistically significant difference, t=5.74,P 0.01 Between the two groups through the T test SPSS18.0 software to analyze.The achieved improved method offers an important tool to the filed of lung biology. 项目基金：国家自然基金青年基金项目 第一作者：严玉玲（1991-08），女，研究生在读，主要从事乳腺癌方向的研究，联系方式邮箱：827356082@。 通讯作者：叶红*，教授，主任医师，从事妇科肿瘤的研究，E-mail:yehong998@126.com。 关键字：AECII；传统方法；改良方法；原代培养 Keywords: AECII；traditional methods；improved methods；primary culture 肺泡Ⅱ型上皮细胞（Type II alveolar epithelial cells，AEC II）是肺上皮细胞的重要组成部分，具有合成和分泌表面活性物质、参与免疫反应以及转分化等多种功能[1]。在胚胎及胎儿时期AEC II可增殖，但在成人期AEC II呈高度分化状态，正常情况下是不分裂增殖的[2]。当AECI细胞数量减少时，发现AEC II可转分化为肺泡I 型上皮细胞（Type I alveolar epithelial cells，AEC I），整个过程可能与TGFβ1传导的信号通路有关[3]，目前还没有能完全替代AEC II的细胞株，为进一步研究AEC II转分化分泌TGF-β1等物质与转移乳腺癌休眠细胞激活相关机制,需分离纯化AEC II。 1，材料与