提取液中黄酮质量浓度测定.doc

红薯中黄酮类化合物的提取2.2.1 芦丁标准溶液的配置 准确称取干燥恒重的芦丁标准品0.0752g, 用体积分数30%的乙醇溶解并定容于250mL容量瓶中, 摇匀, 得质量浓度为0.3008mg/ mL的标准应用液。2.2.2 芦丁标准工作曲线及回归方程的建立 分别吸取芦丁标准溶液0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0 mL, 分别置于0，1， 2， 3， 4，5号共6只25mL的容量瓶中, 用体积分数30%乙醇补充至12.5mL, 再分别加入0.7mL质量分数为5%亚硝酸钠溶液,混匀, 放置5min后分别加入0.7 mL 质量分数10%硝酸铝溶液, 混匀, 6min后分别加入5mL 1mol/ L氢氧化钠溶液, 混匀, 用体积分数30%乙醇标定至刻度线, 放置10min后于510nm处, 以0号试剂作为空白参比, 分别比色测定其吸光度值。用最小二乘法进行线形回归, 得芦丁溶液浓度( C)与吸光度值(A)关系曲线的回归方程式: C= 95.167A-6.2611, R2= 019998。2.2.3 提取液中黄酮质量浓度的测定 分别取一定量的待测提取液或该提取液的溶剂于25mL容量瓶中, 用体积分数30%乙醇补充至12.5mL, 再分别加入0.7mL质量分数为5%亚硝酸钠溶液,摇匀, 放置5min后分别加入0.7 mL 质量分数10%硝酸铝溶液, 摇匀, 6min后分别加入5mL 1mol/ L氢氧化钠溶液, 混匀, 用体积分数30%乙醇标定至刻度线, 放置10min, 取上述中加入溶剂配制的溶液作为空白, 于510nm处, 比色测定提取液的吸光度值。根据芦丁标准溶液浓度(C)与吸光度值(A)关系曲线的回归方程式: C= 95.167A-6.261, R2= 0.9998, 得到稀释后的提取液黄酮质量浓度, 再根据稀释倍数计算得到原始提取液的黄酮质量浓度, 最后计算红薯中黄酮的质量浓度。红薯叶中黄酮类化合物的提取1．2．1芦丁标准曲线回归方程的建立 精密称取100～105℃下干燥至恒重的芦丁标准品20．00mg，置于100mL容量瓶中，加50 mL70％乙醇使之完全溶解，然后加入70％乙醇定容至刻度，摇匀，即得0．20mg/mL芦丁标准溶液。精密吸取芦丁标准溶液0．0mL、2．0 mL、4．0mL，6．0mL，8．0 mL，10．0 mL，12．0 mL，14．0 mL，16．0 mL，分别置于25mL容量瓶中，依次加入l mL 5％NaN02溶液，摇匀，放置6min；再加入1 mL 10％Al(N03)3溶液，摇匀，放置6 min；再加入10 mL 4％NaOH溶液，用70％乙醇定容至刻度，摇匀，放置15min，以蒸馏水为空白，在510 nm波长处测定吸光度A。 柚皮提取物中黄酮类含量的测定参照文献[ 4, 5], 以芦丁为标样测定柚皮提取物中的黄酮含量。标准曲线的回归方程: Y=0.4097X+0.0161, ( Y为芦丁质量浓度mg/mL, X为消光值) 相关系数r=0.9998。