胰腺癌细胞panc-1中lsd1负向调控抑癌基因sirt3的实验研究.pdf

中国癌症杂志 2014年第24卷第2期 《 》 CHINA ONCOLOGY 2014 Vol.24 No.2 87 胰腺癌细胞PANC-1中LSD1负向调控 抑癌基因SIRT3 的实验研究 徐近　秦毅　张波　吉顺荣　许文彦　施思　刘江　虞先濬 复旦大学附属肿瘤医院胰腺肝胆外科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，胰腺肿瘤研究所， 上海 200032 　　［摘要］　背景与目的：组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1，LSD1)是重要的染 色质修饰蛋白之一，可以通过调节染色质的结构调节基因的转录调控，进而影响肿瘤的发生、发展、侵袭、转 移以及代谢异常等恶性潜能，是判断肿瘤预后的生物标志物。Sirtuins家族去乙酰化酶3(sirtuin3，SIRT3) 基因是位于线粒体内的抑癌基因，通过调控肿瘤代谢异常以及氧化损伤行使抑癌基因的功能。本研究通过基 因转录调控的手段，研究胰腺癌细胞PANC-1中LSD1与SIRT3的关系。方法：通过RNA干扰(RAN interference， RNAi)、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation，CoIP)、染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay，ChIP)及启动子活性分析等分子生物学实验手段，探讨LSD1与SIRT3在PANC-1细胞中的关系。结果： 通过RNAi的手段干扰LSD1的表达，发现SIRT3基因转录水平和蛋白水平明显上升；通过蛋白相互作用的手 段，发现LSD1可以与SIRT3转录调控的重要转录因子过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,coactivator 1 alpha，PGC-1α)相互作用；通过ChIP方法，发现 LSD1与PGC-1α共同募集到SIRT3基因的启动子区域染色质上；通过启动子活性分析，发现LSD1 基因可以显著 抑制PGC-1α对SIRT3基因的转录调控。结论：LSD1可以表观遗传调控抑癌基因SIRT3 的转录，为深入研究LSD1 与肿瘤代谢异常以及氧化应激提供了理论依据。 　　［关键词］　胰腺癌；PANC-1；组蛋白赖氨酸去甲基化酶1；过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子-1α； sirtuins家族去乙酰化酶3；表观遗传调控 　　DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2014.02.002 　　中图分类号：R735.9　　文献标志码：A　　文章编号：1007-3639(2014)02-0087-06 LSD1 negatively regulates the expression of tumor suppressor gene SIRT3 in pancreatic cancer cell line PANC-1 XU Jin, QIN Yi, ZHANG Bo, JI Shun-rong, XU Wen-yan, SHI Si, LIU Jiang, YU Xian- jun (Department of Pancreatic and Hepatobiliary Surgery, Fudan University Shanghai Cancer Center; Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University; Pancreatic Cancer Institute, Fudan University, Shanghai 200032, China) Correspondence to: YU Xian-jun E-mail: yuxianjun@fudan.edu.cn 　　［Abstract ］ Background and purpose: Lysine specific deme