sphk1 和fak 对人结肠癌hct116 细胞上皮间质转化的影响.pdf

中国病理生理杂志　Chine e Journal of Pathophy iology　20 16, 32 (3 ):439-444 439 杂志网址:http:/ /www. cjpp . net [ 文章编号] 　1000-4718 (20 16 )03-0439-06 SphK1 和FAK 对人结肠癌HCT116 细胞 上皮间质转化的影响* △ 诸葛春凤, 　刘诗权 , 　谭　林, 　覃蒙斌, 　梁梦紫, 　黄杰安 (广西医科大学第一附属医院消化内科, 广西 南宁530021 ) 　　[ 摘　要] 　目的:研究鞘氨醇激酶1 (phingo ine kina e l, SphK1 )和黏着斑激酶(focal adhe ion kina e, FAK )对 人结肠癌HCT116 细胞上皮间质转化(epithelial-me enchymal tran ition, EMT )的影响。 方法:将人结肠癌HCT116 细胞分成3 组:采用SphK1 抑制剂N, N-二甲基鞘胺醇(N, N-dimethyl phingo ine, DMS)、FAK 抑制剂PF573228 和相 同体积的培养基分别处理细胞。 MTT 法检测细胞活力, We tern blot 方法检测 SphK1、FAK、E-cadherin、N-cadherin、 vimentin 和基质金属蛋白酶2 (MMP2 )蛋白的表达, real-time PCR 检测SphK1、鞘氨醇1-磷酸(S1P )、FAK、E-cadherin 和 vimentin mRNA 的表达, 并应用细胞划痕实验检测肿瘤细胞的迁移能力。 结果:PF573228 和DMS 均明显抑制人 结肠癌 HCT116 细胞的活力, 并呈时间剂量依赖性。 DMS 抑制 SphK1 的表达, 同时下调FAK、N-cadherin、vimentin 和 MMP2 蛋白的表达, 而上调E-cadherin 蛋白表达上调。 PF573228 明显抑制FAK 的表达, 同时抑制 SphK1、N-cad- herin、vimentin 和 MMP2 的表达, 上调 E-cadherin 蛋白的表达(P0 .0 1 )。 划痕实验显示 PF573228 和 DMS 显著抑 制 HCT116 细胞的迁移能力(P 0 .0 1 )。 与对照组比较, PF573228 组和 DMS 组 FAK、SphK1、S1P 以及 vimentin mRNA的表达明显下调, 而E-cadherin mRNA 的表达则明显上调(P0 .05 )。 结论:SphK1 和FAK 信号通路可能在 结肠癌 HTC116 细胞上皮间质转化过程中发挥重要作用。 [ 关键词] 　鞘氨醇激酶1;黏着斑激酶;上皮间质转化;人结肠癌细胞 　　[ 中图分类号] 　R730. 23　　　　　[文献标志码] 　A doi:10. 3969 /j . i n . 1000-4718. 2016. 03. 009 ffects of SphK1 and FAK on epithelial-mesenchymal transition in colon cancer HCT116 cells ZHUGE Chun-feng, LIU Shi-quan, TAN Lin, QIN Meng-bin, LIANG Meng-zi, HUANG Jie-an (Department of Gastroenterology, First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 53002 1, China. E-mail: poempower@163. com ) 　　 [ABSTRACT] 　AIM:To inve tigate the effect of p