高效液相色谱_同位素稀释_电感耦合等离子体质谱法研究大鼠体内汞结合蛋白.pdfVIP

第 35卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究报告 第 6期 　　　　　　　 　　　　　 　　　　　　　　 　　　　 2007年 6月 Chinese Journal of Analytical Chem istry 803～808 高效液相色谱 同位素稀释 电感耦合等离子体质谱法 研究大鼠体内的汞结合蛋白 1, 2 1 1, 2 2 1 史俊稳 　丰伟悦 　王 萌 　张 芳 　李 柏 汪 冰1, 2 　朱墨桃1, 2 　柴之芳1 1 (中国科学院高能物理研究所 ,核分析技术重点实验室 ,北京 100049) 2 (中国科学院研究生院 ,北京 100049) ( ) ( ) 摘 　要 　利用高效液相色谱 HPLC 和电感耦合等离子体质谱 ICPM S 联用技术 ,对经胚胎早期甲基汞暴露的 ( ) ( ) 母 、仔鼠脑胞液和肝胞液中汞结合蛋白进行了研究。采用柱后 Po stColumn 同位素稀释法 ID 技术定量计算 了母 、仔鼠组织胞液中与蛋白结合的汞 。HPLCID ICPM S方法的汞回收率与直接 ICPIDM S法的实验结果一 致 。该方法可以克服生物样品微量元素化合物分析中灵敏度低和标准蛋白不足的缺点 ,有利于生物体内低丰度 金属结合蛋白的分离分析和定量研究。 关键词 　高效液相色谱 ,同位素稀释 , 电感耦合等离子体质谱 ,汞结合蛋白 1　引　言 汞的生物毒性主要源于其与生物体内蛋白质或多肽中巯基的高度结合 ,从而抑制生物体内重要生物 酶的活性 ,进而引发一系列的机体损伤 [ 1 ] 。因此 ,汞暴露后生物体内汞结合蛋白的研究 ,对进一步探讨汞 的毒性机理以及汞的生物毒性评价具有重要的意义 。目前对生物体内汞结合蛋白的研究主要集中在金属 ( ) [ 2, 3 ] 硫蛋白 M Ts 上 ,对生物体内其它的汞结合蛋白的研究还很少 。 生物样品的低挥发性和热不稳定性决定了其微量元素化学形态的研究不宜采用高分辨率的气相色谱 ( ) ( ) GC 法 。与 GC相比,液相色谱 LC 则更适宜于生物样品的分离和分析 。从 LC柱流出的洗脱液可以很 方便地采用传统的元素分析方法 ,如原子吸收、原子荧光等实现在线检测 [ 4 ] 。然而 , 由于生物体内具有特 定生物学信息的微量元素化合物往往含量很低 ,传统的检测器远不能满足实际样品所要求的灵敏度 [ 5 ] 。 [ 6 ] ( ) 1980年 , Suzuk i 最早采用电感耦合等离子体原子发射光谱 ICPA ES 来解决生物样品中微量元素化合物 ( ) 的检测问题 。随后 , 电感耦合等离子体质谱 ICPM S 的问世 ,很好地满足了生物样品中微量元素化合物分 析的高灵敏度的技术要求 [ 7, 8 ] 。 ( ) 高效液相色谱 电感耦合等