20（ s） -ppd 促内质网应激诱导人脐静脉内皮细胞凋亡 - 上海中医药大学.pdf

·70 · AC T A U N IVEＲ SIT AT IS T Ｒ ADIT IO N IS M EDIC ALIS SIN EN SIS PHAＲ M AC O LO GIAEQ U E SHAN GHAI Vol． 29 N o ． 3 M ay，20 15 20 (S)-PPD 促内质网应激诱导人脐 静脉内皮细胞凋亡 1 2 1 2 2 张学礼 韩志芬 夏花英 蒋嘉烨 张 彤 1． ( 201203) 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室 上海 2 ． ( 201203) 上海中医药大学教学实验中心 上海 【 】 : (protopanaxadiol ，PPD) 20 (S)-PPD 摘 要 目的观察原人参二醇 中 对人脐静脉内皮细胞凋亡的作用 。 :20 (S)-PPD ，MTT ，DAPI 并探讨其作用机制 方法 处理人脐静脉内皮细胞 法检测细胞增殖 染色检测细胞 ，Calpain Calpain ， 3 ，3- 核形态变化 活性检测试剂盒检测胞质 活性 内质网荧光探针 二己基恶羰花青碘化物 ， PCＲ XBP-1 CHOP mＲNA ，Western blot 染色检测细胞内质网形态变化 实时定量 检测拼接 以及 水平 检测 Caspase-3 、Caspase-8 、bax 、bcl-2 、ATF-6 、 IＲE1、 PEＲK、ATF-4 CHOP 。 磷酸化 磷酸化 以及 蛋白水平 :20 (S)-PPD 10 mol / L 6 h 5 mol / L 24 h 结果 μ 以上处理人脐静脉内皮细胞 或 μ 以上处理 均能显著抑制其细 。20 (S)-PPD 10 mol / L 6 h ，DAPI 胞活力 μ 处理人脐静脉内皮细胞 后 染色发现细胞出现明显染色质固缩 ; 3 ，3- ， 及核碎片 内质网荧光探针 二己基恶羰花青碘化物染色显示内质网形态发生显著变化 出现内质网碎 ; Calpain ;Western blot Caspase-3 片并且在核周聚集成颗粒 胞质 活性未见显著改变 检测到凋亡相关蛋白 活 ，Caspase-8 ，bax ， bcl-2 性片段