与nr1 亚基的相互作用1 - 北京大学神经科学研究所 - 北京大学医学部.pdfVIP

中国科技论文在线 DREAM (downstream regulatory element antagonist modulator)与NR1 亚基的相互作用1 张瑛，韩涛，王韵* 北京大学神经科学研究所，北京大学医学部神经生物学系， 教育部及卫生部神经科学重点实验室，北京（100191 ） E-mail: wangy66@ 摘 要：DREAM (downstream regulatory element antagonist modulator)属神经元钙感受器 (neuronal calcium sensor ，NCS) 家族KChIP (potassium channel interacting protein)亚家族成 员，是在神经系统高表达的一种多功能蛋白，在不同的亚细胞定位时可能发挥不同的功能， 位于胞浆，可发挥presenilin 作用蛋白的功能；位于细胞核内，可发挥转录因子的功能；位 于细胞膜，可发挥Kv4 通道调节蛋白的功能。本研究通过免疫共沉淀和GST-pull down 实验 首次发现，DREAM 可以与NMDA (N-methyl-D-aspartate) 受体NR1 亚基的C 端结合，并且， 由于DREAM 含有可结合Ca2+ 的EF hand 结构域，Ca2+可增强二者的结合。DREAM N 端（1-50 位氨基酸）和C 端（51-256 位氨基酸）均可以与NR1 亚基C 端结合。进一步通过EF hand 突变体的研究显示，虽然DREAM 与NR1 亚基的结合不依赖于EF hand 结构域，但EF hand 结构域可对二者的结合发挥调控作用。该研究提示DREAM 可能作为NMDA 受体功能的调 控分子。 关键词：DREAM/calsenilin/KChIP3；Ca2+结合蛋白；NMDA 受体；NR1 亚基；蛋白质相互 作用 中图分类号：Q189 1 引言 DREAM (downstream regulatory element antagonist modulator) 是于1999 年在分离与人 前强啡肽原(preprodynorphin, PPD)基因启动子区域结合的蛋白质时发现的一种转录抑制子。 它可以四聚体的形式结合到启动子TATA box 下游的DRE (downstream regulatory element, DRE)位点，机械阻断RNA 聚合酶II的前行，抑制基因转录而由此得名[1-2] 。DREAM 是第一 个已知的可以直接与DNA 结合，发挥转录调控作用的Ca2+结合蛋白。在此之前，人们发现 的一种新蛋白质calsenilin，由于其可以同时与Ca2+和presenilin (PS)结合而被命名，以及之 后发现的KChIP (potassium channel interacting protein, KChIP) 蛋白家族，它们可以与Kv4 通道的胞内N 端作用，其中一个成员KChIP3 ，与DREAM 实为同一种物质[3-4] 。因此，calsenilin, DREAM 和 KChIP3 是对同一蛋白的不同命名（以下均简称DREAM ）。大鼠的DREAM 含 有256 个氨基酸，分子量约为30 kDa，在神经系统有高表达，但在甲状腺、胸腺、松果体 和垂体等非神经组织也有表达[1,5-8] 。 DREAM 属神经元钙感受器 (neuronal calcium sensor ，NCS) 家族，该家族包括frequenin/ NCS-1; VILIP (visinin like protein), neurocalcin 和 hippocalcin; recoverin; GCAP (guanylyl cyclase activating protein); KChIPs, 包括KChIP1, 2, 3 和4, KChIP4 又称为CALP (calsenilin like protein) [9-10] 。NCS 家族成员可作为Ca2+感受器，通过其EF hand 结构域与Ca2+结合， 参与对囊泡分泌、递质释放、鸟苷酸环化