蚕丝腺丝素酶及其特性.pdfVIP

2009年第3期 闪，●丝tI习 蚕丝腺丝素酶及其特性 何忠琴 编译，王建南 校 (辽宁丹东市 118000) 摘 要 ：通过对丝腺丝素酶的分离，用 SDS—PAGE法测定它的活性 ，认为 4龄幼虫眠期 (D。期)和0天龄蛹的丝腺 中丝素酶的活性最大。确认丝素酶是类组织蛋 白酶 L的半胱氨酸蛋 白酶，pH5时活性最高 。还详细叙述 了蓖麻蚕 丝腺丝素酶的分离和性质。蓖麻蚕的丝素酶也能分解丝素和丝胶 ，也是类组织蛋 白酶 L的半胱氨酸蛋 白酶，但不 同的是，蓖麻蚕丝素酶在末端氨基酸序列上和家蚕不同。其 5龄幼虫吐丝开始后，酶的活性急剧增高，达到家蚕丝 素酶活性 的38倍 。 关键词 ：家蚕 ；蓖麻蚕；丝腺 ；丝素酶 ；丝素 ；丝胶 ；分解 一 说到蚕的吐丝，通常会想到 5龄后期的旺盛 已知来 自哺乳动物蛋白酶的糜蛋 白酶及来 自微 结茧。但实际上，蚕在 1～4龄期 ，亦即各龄期结束 生物的蛋白酶能分解丝素 ，被用于丝素结构的研究。 进入眠期之前，就在丝腺中合成、吐出蚕丝了。正如 除角 田素行研究过的丝腺丝素酶外，尚未见到 用人工饲料饲育时所见 的那样 ，在饲料不足时蚕也 过将丝素作为生物体 内基质进行特异性分解的昆虫 吐丝。在吐丝期之前 ，经生物合成，分泌并贮存在腺 蛋 白酶的研究 。 腔中的蚕丝被吐出后 ，有的仍残留在腺腔中。但 以 丝素和丝胶有特定的氨基酸组成和排列。家蚕 后就从丝腺的腺腔 中消失 了。也就是，在 4龄幼虫 丝素是 由3种单元，即H链、L链 、P25，以摩尔比为 眠期 ，积累在腺腔 中的丝素和丝胶被全部分解 了。 6：2：1组成的蛋 白质 。丝素 H链 的所有部位上 此外 ，蛹初期残存在丝腺 中的丝素和丝胶在残 留丝 都存在 Gly—Ala重复排列。假如存在专 门切断 H 腺消失前通过细胞凋亡被分解 。因而认为，丝腺丝 链上 Gly—Ala肽键 的蛋白酶，则丝素 H链的酶分解 素酶和这些生物现象有关。 如下：最初将 H链分解出来的丝素肽再次同样成为 丝素酶也可以从食桑期和吐丝期的蚕丝腺细胞 蛋 白酶的良好基质 。然后被分解出来的丝素肽又成 中提取到。食桑期和吐丝期的丝素酶功能是分解被 为蛋白酶的良好基质。反复重复这样的过程，最后 输送到丝腺细胞的溶解体内的蛋白质和细胞 内小器 变成8个或 4个氨基酸的低分子肽 ，在基质的大小 官。总之 ，丝腺丝素酶的特征是，为了分解蚕本身生 已经不能成为蛋白酶分解基质之前 ，丝素的H链应 物合成的丝蛋白质 ，蚕本身是利用 了在丝腺 中生物 该是被不断分解的。若欲进一步了解丝素酶是如何 合成的蛋白酶。 切断液状丝素Gly-Ala之间肽键的话 ，可通过 SDS— 本文在提示上述结论依据的同时，介绍 了丝腺 PAGE(十二烷基硫酸酸钠一聚丙烯酰胺凝胶)电泳 丝素酶分解丝素的特性 。 来阐明。 1 分解蚕丝的昆虫蛋白酶 2 丝腺丝素酶的分离和生物化学特性 昆虫 的蛋 白酶研究和 昆虫独有 的生物现象有 角 田素行于 1988年开始研究 “蚕丝腺能否生成 关，也就是和从固体物经过液体的多样化食物消化、 分解蚕丝的丝素酶，并提出它的 “功能”问题。研究 变成成虫的蛾破茧而出、伴随发育变态的组织破坏 、 它的理由是：①以酶为指标 ，研究蚕 的发育生物学 ； 脱皮等有关。 ②在研究蚕的基础上 ，再研究蚕独特器官——丝腺 2