微小RNA-34a靶向X连锁凋亡抑制蛋白基因对肝癌细胞增殖的影响.pdfVIP

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微小RNA-34a靶向X连锁凋亡抑制蛋白基因对肝癌细胞增殖的影响.pdf

·1622· ·实验研究· 微小RNA一34a靶向X连锁凋亡抑制蛋白 基因对肝癌细胞增殖的影响 张正威 卢忠心 刘水逸孔晓宇 王静魏礼清 【摘要】 目的观察微小RNA一34a(miR一34a)及其靶基因X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)对肝 癌细胞增殖活力和细胞凋亡的影响及其能机制。方法通过脂质体将人工合成的miR-34a模拟物 及其阴性对照以终质量浓度200nmol/L转染人肝癌SMMC7721细胞,采用细胞计数试剂盒-8 (CCK.8)检测转染后SMMC7721细胞的增殖活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡,并进一步采用实 blot分析XIAP的表达水平。结果转染miR一34a 时荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)和Western 模拟物的实验组细胞的增殖抑制率在24、48、72h均显著高于对照组细胞(P0.01),并且在72h转 染组细胞凋亡率(6.984-0.13)%高于阴性对照组(4.894-0.12)%和空白组(4.024-0.21)%(P 0.05)。miR-34a模拟物转染SMMC7721细胞后,XIAP蛋白在空白组、转染组和阴性对照组的相对 4-0.028、0.4894-0.033和0.982 表达量分别为0.942 4-0.032,转染组较其他两组明显降低(P 0.05)。结论miR一34a可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与其下调XIAP的表达有关。 【关键词】癌,肝细胞;微小RNA一34aX连锁凋亡抑制蛋白 EffectofmicroRNA-34aandits X——linkedinhibitorof on targetgene apoptosisproteinprolifera·· tion andcell of cells apoptosis Zhengwei,£u Shuiyi, activity hepatocarcinomaZhang Zhongxin,Liu Central 硒喈Xiaoyu,WangJing,耽iLiqing.DepartmentofIntegratedMedicine,WuhanHospitalAffilia— tedto Medical Scienceand Tongii of 430014,China College,HuazhongUniversity Technology,Wuhan author:Wei CorrespondingLiqing.Email:zhezhu2000@163.C01TL To theeffectof x—linked Objecfive 【Abstracl】 investigate microRNA一34a(miR一34a)on inhibitorof itsroleinthe andcell of apoptosisprotein(XIAP)andproliferationactivity apoptosishepato- mimic control intohuman carcinomacells.MethodsmiR一34aandits weretransfected Synthetic negative SMMC7721cellstoafinalconcentrationof20

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