犐犚犜1调控犘犉犗犃诱导小鼠肝损伤的作用及机制研究.PDFVIP

第二军医大学学报 年 月第 卷（增刊） ２０１４ １０ ３５ ·１５２· ， ， （ ） ＡｃａｄｅｍｉｃＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒ ＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔ Ｏｃｔ．２０１４Ｖｏｌ．３５Ｓｕ ｌ ｙ ｙ ｐｐ 犅犛２１８ 去乙酰化酶犛犐犚犜１调控 犘犉犗犃诱导小鼠肝损伤的作用及机制 研究 陶恩威，余张萍，张 蒙；指导教师：张大雷 　 南昌大学 ２０１２级临床专业 立论依据】 流行病学调查发现，全氟辛酸（ ）和人类多种疾病密切相关。我们前期研究发现 可 ＰＦＯＡ ＰＦＯＡ 　　 　 通过氧化应激、炎症反应和诱导凋亡引起小鼠肝脏毒性损伤。去乙酰化酶 ＳＩＲＴ１在细胞应激反应中具有关键作 用，可引起多种转录因子去乙酰化，从而促进细胞存活，抑制凋亡。因此，我们提出：“ＳＩＲＴ１的去乙酰化修饰可能 对 ＰＦＯＡ诱导的小鼠肝损伤起保护作用”。 设计思路】 在前期研究的基础上，探讨ＰＦＯＡ肝脏毒性与ＳＩＲＴ１表达和反应活性的相关性；利用ＳＩＲＴ１激 　 活剂以及 抑制剂观察 信号通路对 诱导的肝脏毒性损伤的调控作用；通过检测 、 ＳＩＲＴ１ ＳＩＲＴ１ ＰＦＯＡ Ｐ５３ＮＦＢ κ 　　 　 和 的表达和乙酰化水平，分析 系统调控 肝脏毒性的分子机制，是否与 对 、 ｐ６５ ＦＯＸＯ３ａ ＳＩＲＴ１ ＰＦＯＡ ＳＩＲＴ１ Ｐ５３ 　　 　 　　　 　 　　　 　 和 的去乙酰化修饰有关。 ＮＦＢ ６５ ＦＯＸＯ３ａ κ ｐ 实验内容】 （） 和蛋白质印迹方法检测 的表达，免疫共沉淀法检测 的反应活 １ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ ＳＩＲＴ１ ＳＩＲＴ１ 　 性，对比正常对照和 染毒小鼠，明确 肝脏毒性与 的相关性；（） 染毒小鼠给予 ＰＦＯＡ ＰＦＯＡ ＳＩＲＴ１ ２ ＰＦＯＡ ＳＩＲＴ１ 激活剂ＳＲＴ１７２０以及 ＳＩＲＴ１抑制剂尼克酰胺，石蜡切片 ＨＥ染色观察肝组织病理学改变；全自动生化分析仪检测 、 、 及 的血清水平；酶联免疫分析 、 及 的肝组织水平；免疫组化检测 氧化 ＡＬＴＡＳＴＡＬＰ ＬＤＨ ＩＬ６ＣＯＸ２ ＣＲＰ ＤＮＡ 损伤标志物 的产生；比色法检测 生成及 、 和 的活性； 染色法观察细胞 ８ＯＨｄＧ