8a胱氨酸致内皮细胞损伤中的作用研究.pdf

重庆医科大学学报 2011 年第 36 卷第 12 期（JournalloflChongqinglMedicallUniversity!2011.Vol.36 No.12 ） — 1409 — 基础研究 DOI ：10.3969/j.issn.0253-3626.2011.12.001 TLR4/NF-κB 信号通路在同型半胱氨酸致内皮细胞损伤中 的作用研究 1 2 2 2 2 1 徐支芳 ，于海娇 ，马琳娜 ，巩慧慧 ，梁 宇 ，姜怡邓 （宁夏医科大学 1.基础医学院病理生理学教研室 ；2.检验学院生化教研室 ，银川 750004 ） 【摘 要】目的：Toll 样受体 4 （Toll-like receptor-4 ，TLR4 ）/核因子-κB （Nuclear factor kappa B ，NF-κB）在同型半胱氨酸 （Homo－ cysteine ，Hcy）致动脉粥样硬化 （Atherosclerosis ，AS ）过程中损伤内皮细胞的作用机制 。 方法 ：体外培养原代人脐静脉内皮细胞 （Human umbilical vein endothelial cells ，HUVECs），用 0、50、100、200、500 μmol/L Hcy 和 100 μmol/L Hcy+30 μmol/L （维生素 B12 +叶酸）分别与 HUVECs 培养 72 h 后 ，采用 MTT 法观察 Hcy 对 HUVECs 活性的影响 ；用分光光度比色法检测各组 HUVECs 中 丙二醛 （Malondialdehyde ，MDA）和超氧化物歧化酶 （Ｓuperoxide dismutase ，SOD ）；酶免法检测 NF-κB ；荧光定量 PCR 和 Western blot 分别测 TLR4 mRNA 和蛋白表达。 结果 ：Hcy 可抑制 HUVECs 的活性 ，各 Hcy 干预组与对照组比较细胞活性均降低 ，其中 100、200、500 μmol/L Hcy 组与对照组比较差异有统计学意义 （P0.05），而其他组与对照组比较差异无统计学意义 （P0.05）；随 Hcy 浓度增加 MDA 和 NF-κB 含量和 TLR4 mRNA 和蛋白表达明显增加 ，而各实验组 SOD 活性明显降低 ，其中 ，100、200、500 μmol/L Hcy 组与对照组比较差异有统计学意义 （P0.05），其他组与对照组比较差异无统计学意义 （P0.05）。 结论 ：TLR4/NF-κB 可能是 Hcy 致 HUVECs 损伤的重要机制之一 ，其中 MDA 和 SOD 起了重要的作用 。 【关键词】人脐静脉内皮细胞 ；动脉粥样硬化 ；同型半胱氨酸；Toll 样受体 4 ；核因子-κB 【中国图书分类法分类号】R363 【文献标志码】A 【收稿日期】2011-08-18 An investigation on mechanism of the TLR4/NF-κB on Hcy to promote the damage of HUVECs 1 2 2 2 2 1 XU Zhi-fang