产生的是黏性末端.PPTVIP

2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。 * 抗虫棉 普通棉 回忆旧知识 重组DNA转移到动物受精卵中。 将人的生长激素基因注射到小白鼠受精卵中，得到的“超级小鼠”。 基因工程又叫做DNA重组技术 通俗地说，就是按照人们的愿望，进行严格设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 什么叫基因工程？ 一、限制性核酸内切酶 “分子手术刀” 每种酶识别某种双链DNA分子特定的核苷酸序列，使每一条链中两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(具专一性) 主要是从原核生物中分离纯化出来的，切断外来的DNA ，在内部进行，故名限制性核酸内切酶。 4000种 1、来源： 2、种类： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 黏性末端 平末端 黏性末端是如何形成的？ 大肠杆菌(EcoRI) 限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 黏性末端 黏性末端 黏性末端：被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的 核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 什么叫平末端？ 当限制酶切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，产生的是黏性末端。 要想获得某个目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？一个目的基因有几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端，两个。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端。 思考题： 二、 DNA连接酶—— “分子缝合针” 切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接，你觉得可以用什么酶？ 1、种类： 2、作用部位： 两类 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 磷酸二酯键 二、DNA连接酶——“分子缝合针” DNA连接酶连接被限制酶切开的两个核苷酸之间的的磷酸二酯键。 E.coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端 教材P7思考与探究 1 运载体： 常用主要有两类： 1）细菌的质粒(绝大多数是环状DNA分子) 2）入噬菌体或某些动植物病毒 三、基因进入受体细胞的载体 —“分子运输车” 能带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 标记基因的作用鉴别受体细胞中是否含目的基因。如将来可用含青霉素的培养基鉴别，将含目的基因的细胞筛选出来。 3. （1） 载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。 （2） 载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。 （3） 载体DNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。 （4） 载体DNA必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去。 （5） 载体DNA分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。 实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。 *