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人肝细胞窦状间隙内皮细胞的分离培养-第三军医大学学报
DOI: 10. 16016 /j . 1000 -5404. 1996.05.002
199610 ACT A AC ADEMIAE MEDICIN AE MILITARIS TERTIAE Oct. 1996 379
、、
王晓军 罗向东 丁 健 罗 勤 杨宗城 ( )
, 630038
,Ⅳ
。,,
,90% 。 95%。90%
。,
。
;;;
R329. 2
、, 3,50× g 3 mi ,
[ 1] 。;
, 。
, 0. 4% ;。
,、, 1640 ( 10% AB)2×
5 [3]
。 10 /m l 。 37 ℃、 5%
CO 18 h~ 20 h,,
、。 2
7 ~ 10 。
d d
1
1. 4 肝窦间隙内皮 胞分离、培养
1. 1 标本及主要试剂
,50× g 3 mi 500× g
, 8,
5 mi 3~ 5,,1640
5 × 6 。: Ⅳ ;Ⅷ
cm cm Sigma 。
; BRAUN ULE
。 0. 4% ,
;、 ; 1640 199
Nu clo M 。3 ~ 4 ,6
h h
Sigma,。 [4 ]
。 20 h,,
1. 2 肝组织悬液的制备 199( 10% ) 7 ~ 10 。
M AB d d
45 mi 。
( EDTA 0. 019% , pH 7. 4,) 2
,。(37℃ 2. 1 肝 胞、肝窦间隙内皮 胞的存活率
) BRAUNULE, 3~ 95% ,
5, 20 m l,, 90% ,95% ,
, 0. 05% Ⅳ 15 ml~ 20
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