医学微生物学试验一课件.PPT

酵母菌 《医学微生物学与寄生虫学》实验课件 实验内容 一、显微镜的使用及细菌的简单染色 二、细菌的革兰氏染色 三、酵母菌的形态观察及大小的测定 四、霉菌的形态观察 实验室规则 微生物学实验要求 1、微生物无处不在：故要树立无菌观念，实验过程要无菌操作; 2、实验材料为病原微生物，具有感染性 1）穿好白大衣，除必要的书籍、记录本及文具外，其他 个人用品不得带入实验室； 2）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室 3、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完成实验报告； 4、爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室仪器不得乱摸乱碰；如实填写仪器使用登记本； 5、实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负责关门、关窗、关水、关电。 一、显微镜的使用及细菌的简单染色 二、显微镜的使用 （一）观察前准备 1. 拿取显微镜 2. 调节光照 3. 调节光轴中心 （二）低倍镜观察? 操作要点： 粗旋钮调节：物像出现 细旋钮调节：物像清晰 为什么镜检任何标本都要先用低倍镜观察？ （三）高倍镜观察 在低倍镜转换高倍镜 适当调节细螺旋即可看到物像 在转换物镜时要从侧面观察，避免镜头与玻片相撞。 操作步骤 注意 （四）油镜观察 1.滴油（不要抹开） 2.转换为油镜头，使其浸入香柏油 3.调节细螺旋即可找到物像 油镜头须浸入油中 使用油浸物镜时要特别小心，避免由于“调焦”不慎而压碎标本并使物镜受损。 注意 4.玻片处理 5.镜头擦拭 ---如香柏油不慎玷污非油浸镜头应立即直接拭去 （勿用二甲苯） ---擦拭时沿一个方向，禁止旋转 6.还原各部分 7.填写显微镜使用记录 注意 细菌的简单染色 （一）实验用细菌 1．球菌： 葡萄球菌(葡萄状排列) 2．杆菌： 大肠杆菌、枯草杆菌等 简单染法：  一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色。 （二）实验步骤 1. 涂片：蒸馏水和取菌时不宜过多且要涂均匀，不宜过厚。 2. 干燥：室温自然干燥。 3. 固定：将玻片连续从酒精灯火焰上通过3-4次。 4. 染色 5. 水洗：水流不宜过急、过大，以免涂片薄膜脱落。 6.干燥 7. 镜检。 作 业 1、葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌形态图。 2、说明油镜加香柏油的原理 二、细菌的革兰氏染色 常用染色方法 单染法： 一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色； 复染法： 两种或两种以上染料染色，有助于鉴别细菌，如革兰染色法和抗酸染色法。 结晶紫 碘液复染 酒精 复红 G-菌： 类脂质多 肽聚糖少 G+菌： 肽聚糖多交联度大 类脂质少 渗透性学说：两类细菌的细胞壁成分和结构差异 【原理】 【材料】 1. 枯草芽孢杆菌、大肠杆菌 2. 革兰染色液。 【步骤】 革 取材：培养混合菌液 放大倍数：100X10 革兰染色结果 【结果】 作 业 1、图示所观察到的菌体细胞的形态与革兰氏染色结果。 2、为什么革兰氏染色所用细菌的菌龄一般不超过24小时？ 三、酵母菌的形态观察及大小的测定 【原理】 1、基本原理 微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定需借助测微尺---目镜测微尺和镜台测微尺 镜台测微尺： 是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将1mm等分为100小格，每格长0.01mm。用于校正目镜测微尺每格的相对长度。目镜测微尺： 是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，测量时，需要将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物象。 由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，计算出细胞的实际大小。 球菌用直径来表示其大小；杆菌则用宽和长的范 围来表示。 【步骤】 （1）装目镜测微尺(换目镜) 把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的格板上，然后旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。 （2）校正目镜测微尺： 1）放镜台测微