rbc计数形态检查hb测定.ppt

红细胞计数、红细胞形态检查、血红蛋白测定 检验系临检教研室 陈丽华 目的要求 1.掌握：①红细胞计数、氰化高铁血红蛋白测定的原理、方法、质量控制、参考值、方法学平价及临床意义 ； ②红细胞形态。 2.了解：血红蛋白测定其他方法 。 目的要求 重点 :红细胞计数、血红蛋白测定的原理、血片 红细胞形态、 难点:红细胞检验的形态、质控。 一、概 述 1.红细胞的生成 2.红细胞的破坏 健康人红细胞平均寿命120天。 红细胞主要因衰老而消亡，破坏主要在单核-巨噬细胞系统，器官主要是在脾脏和肝脏；其次为骨髓和其他部位。 二、红细胞计数 红细胞计数（red blood cell count,RBC）即测定单位体积内红细胞数量。是血液一般检验的基本项目，常作为诊断贫血和红细胞增多的主要指标之一。 （一）显微镜计数法 【检测原理】 采用等渗稀释液将血标本稀释一定倍数，滴入血细胞计数室中，显微镜下计数一定区域内红细胞数，经换算得每升血液中红细胞数量。 【器材】 微量吸管，采血针，小试管，计数板，盖片，棉球，显微镜。 【试剂】红细胞稀释液：任选一种 1.Hayem稀释液：氯化钠1.0g、硫酸钠（含10个结晶水）5.0g，氯化高汞0.5g，蒸馏水加至200mL，过滤后使用。 氯化钠---调节渗透浓度 硫酸钠---提高比重防止红细胞粘连 氯化高汞---防腐剂，有毒 2.柠檬酸盐甲醛盐水 氯化钠 0.6g 调节渗透压 柠檬酸钠 1.0g 调节渗透压，抗凝 36%甲醛 1ml 防腐 蒸馏水加至100ml，过滤2次后使用。 3.生理盐水或加1%甲醛的生理盐水 【操作】 1.中号试管（15×100mm）加等渗稀释液2ml； 2.毛细血管采末梢血10μl加入上述稀释液，立即摇匀（稀释200倍）； 3.充池，静置2min后以低倍镜计数中间大方格内四角和中央5个中方格内的红细胞数。 红细胞计数 2ml稀释液 充分混匀 10ul血液 充池、静止 镜下计数 3mm WBC WBC WBC WBC 1mm 【方法学评价】 1．手工显微镜法 2．血液分析仪法 为目前主要临床检验细胞计数方法 变异系数（coefficient of variation, CV ）小。 【质量控制】 1．手工法 误差来源包括：标本、操作、器材、固有误差（计数域误差） 2．仪器法 严格按操作规程；定期作室内和室间质控。 【注意事项】 1.采血及摇匀迅速，防止血液凝固； 2.器械应防酸防碱且干燥； 3.充池要摇匀； 4.计数时，应识别酵母及白细胞。 三、血红蛋白测定 （一）血红蛋白的结构 血红蛋白结构： 由珠蛋白和亚铁血红素结合组成。 【分类】（每个珠蛋白分子含两条α 链和两条非α 链） 正常人：HbA （ α2β2） 占90% 成人主要血红蛋白； HbA2（ α2δ2 ） 占2%-3% 成人次要血红蛋白 HbF （ α2γ2 ） 占2%以下 胎儿主要血红蛋白 生理情况下，99%Hb的铁呈Fe2+状态，称为还原血红蛋白，亚铁状态的Hb与氧结合称氧合血红蛋白（HbO2). 1%Hb的铁呈Fe3+状态，称为高铁血红蛋白（Hi）。 注意事项：1. 如α-链或β-链合成障碍，使三种正常血红蛋白比例异常，即各型地中海贫血；如多肽链发生氨基酸置换、丢失、加长，称为血红蛋白病 。 2.病理情况下可出现硫化血红蛋白（SHb）。 （二）血红蛋白衍生物及其吸收光谱 1.氧合血红蛋白（oxyhemoglobin, HbO2）:Hb与O2结合时形成。 2.还原血红蛋白（reduced hemoglobin, Hbred）：未与O2结合时的Hb。 3.高铁血红蛋白（hemiglo -bin, Hi）或正铁血红蛋白（methemoglob