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发酵液过滤特性的变化
第一节 发酵液过滤特性的改变
发酵液成分复杂:菌体,残存的固体培养基,未被微生物完全利用的糖类、无机盐、蛋白质,以及微生物的各种代谢产物。
发酵液特性:
1、发酵产物浓度较低,大多为1%—10%,悬浮液中大部分是水;
2、悬浮物颗粒小,相对密度与液相相差不大;
3、固体粒子可压缩性大(细胞在很大程度上属于可压缩的粘稠物料);
4、液相粘度大,大多为非牛顿型流体;
5、性质不稳定,随时间变化,如易受空气氧化、微生物污染、蛋白质酶水解等作用的影响。
以上使固液分离变得相当困难,应进行适当预处理才行,降低滤饼比阻,提高过滤与分离速度
U×A=
A2△P
X=
A△P
xwμ(v+vF)
Uwμ(v+vF)
A:过滤面积;△P:为通过滤饼和过滤介质后的压力降;
U:滤液通量;W:单位滤液体积中沉积固体的干重;
u:滤液的粘度;V:单位时间内累积的滤液体积。
vF为沉积与过滤介质阻力相当的滤饼厚度所滤过的滤液体积
x=(m-n-1ln+1t2n)(△P)n
△P:为通过滤饼和介质后的压力降;
m:单位质量干滤饼对应过滤饼的质量;
l:床层厚度;
n:常数,滤饼的可压缩度,不可压力n=0,高度可压n=1;
n=0,x=m-1l=l/m,x下降减少床层厚度;m上升减少滤液的悬浮物;
n=1,x=m-2l2t2(△P)2,x下降l下降,t下降(过滤时间),△P下降悬浮物,粘度下降,m上升,减少悬浮物。
一、降低液体粘度(加水、加热)
对于通过一个圆形直管的粘性流可采用哈根—泊肃叶(Hagen-poiseuilles)议程:
U=
Dc2△P
→
U=
dm2△P
32μlc
kμbm
U:流体的平均速度,μ为流体的粘度,△P为流体流过圆管的压力降,dc和lc分别为圆管的直径与长度。dm、bm为流体流过滤床层的当量直径为长度。K,常数取决于床层结构。
可见U与μ成反比,降低粘度可有效提高过滤速率。
1、加水稀释法:
(1)加大后继过程的处理任务;
(2)实际效果:即若加水一倍,则稀释后液体的粘度下降50%以上才能有效提高过滤速度。
2、加热:
加热可降低粘度:如120Be麦芽汁40度加热到75度粘下降一半,速可加倍。如链霉素PH3.0时,加热70度,半小时,过滤速度可增大10—100倍。(有蛋白质凝聚,m上升)
(1)加热温度控制:不影响目标产物的活性;
(2)时间控制:不造成细胞溶解,胞内物处溢,使后续分离纯化复杂化。
二、调整PH
(1)对于两性物质(氨基酸、蛋白质),调PH至等电点,所带净电荷为零,溶解度最小,发生等电点沉淀。
(2)膜过滤中,调整PH改变易吸附分子的电荷性质,减少堵塞和污染;
(3)细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个PH值下有可能凝聚成较大颗粒,有利过滤。
三、凝聚与絮凝
1、凝聚
(1)双电层:发酵液中胶体粒子的表面——带电荷(吸附溶液中的离子,自动基因的电离)——如菌体或蛋白体(生理PH值下)带负荷——静电引力,吸附阳离子——在界面形成双电层——使胶粒之间不易凝聚,稳定分散。双电层电位越高,电排反越强,胶粒稳定,分散越好,过滤越难。
(2)电解质的凝聚:
加入电解质——异电离子作用下,双电原电位降低——胶体稳定下降——相互碰撞而凝聚。
(3)凝聚值
凝聚值:使胶粒发生凝集作用的最小电解质浓度(mmol/L)。
反离子的价数越高,凝聚值就越小。A13+>Fe3+>H+……
常用的有明矾(硫酸铝)、石灰、硫酸亚铁、三氯化铁等。
2、絮凝
①相对凝颗粒粗大;
②相对凝聚更为昂贵;
(1)絮凝剂的絮凝作用:
絮凝剂(能溶于水的高分子聚合物,相对分子质量数万—1千万,长链结构)——链节上含有许多活性官能团,阴离子(-)或阳电子(-NH3+)、不带电的非离子型基团——通过静电引力、范 华力、氢键等吸收在胶粒表面——当许多链节分别吸附在不同胶粒表面上——产生桥架联授——形成较大絮团。
(2)絮凝剂化学结构
①含有相当多的活性官能团,能与胶粒表面结合。
②长链线性结构,与较多的胶粘液表面结合。
③相对分子质量不能超过限度,保证其有良好的水溶性。
(3)絮凝剂的分类:
①有机高分子聚合物:如聚丙大 类(絮团粗大、用量少、絮凝快、效好,但有毒)、聚丙烯酸类(无毒,可用于医药、食品)、聚乙烯等。
②无机高分子聚合物、如聚合铝盐、聚合铁盐等。
③天然有机高分子絮凝剂,如明胶、骨胶、壳多糖、海藻酸钠、聚糖类胶粘物。
(4)影响絮凝效果的因素(确定了某种絮凝剂)
①添加量:试验确定最适添加量
少:胶粒吸附不完全
多:形成的絮团小
②PH值:影响絮凝剂活性官能团的电离度,进一步影响吸附强弱。
另外还有:搅拌转速、时间等。
3、混凝
混凝是包括凝聚和絮凝机理的过程。
(1)单独使用絮凝剂
如带负电的菌体、蛋白
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