牛病毒性腹泻-黏膜病诊断方法研究进展.pdfVIP

动物医学进展。2008，29(2)：93—97 Progress in Veterinary Medicine 牛病毒性腹泻一黏膜病诊断方法研究进展 张 宁 ，秦建华。，赵博伟。，张富梅 ，胡晓悦 ，赵月兰。 (1．河北省畜牧兽医研究所，河北保定 071000；2．河北农业大学，河北保定 071000；3．河北省畜牧兽医服务中心． 河北石家庄 050000；4．河北北方学院．河北张家口 0725029；5．河北省动物疾病预防控制中心，河北保定 07lOOO) 摘 要：牛病毒性腹泻一黏膜病是由黄病毒科、瘟病毒属的牛病毒性腹泻病毒引起的一种传染性疾病。 该病以发热、黏膜糜烂、溃疡、白细胞减少、腹泻、怀孕母牛流产或产畸型胎儿为主要特征。该文就近几年来 国内外对该病的实验室诊断方法，包括病毒分离、血清学试验、电镜观察、免疫荧光技术、聚合酶链反应技术 等的研究概况进行了综述。 关键词：牛病毒性腹泻病毒；分离与鉴定；诊断 中图分类号：S852．659．6 文献标识码：A 文章编号：1007·5038(2008)02—0093·05 牛病毒性腹泻一黏膜病是由黄病毒科、瘟病毒属 素，接种牛肾继代细胞或犊牛睾丸细胞，盲传几代后 的牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus， 观察细胞病变情况。这种方法只能检测出致细胞病 BVDV)，又称为牛病毒性腹泻一黏膜病病毒(Bovine 变(CP)型BVDV，而且由于非致细胞病变(NCP)型 viral diarrhea—mucosal disease virus，BVD-MDV)引 BVDV株常能干扰另一株有致细胞病变作用的毒株 起的传染病，临床上以发热、黏膜糜烂、溃疡、白细胞 产生细胞病变，因此还需应用蚀斑减数试验等方法 减少、腹泻、怀孕母牛流产或产畸型胎儿为主要特 证明这类毒株的存在[6]。张保宁等[7- 从河北省某 征。该病呈世界性分布，广泛存在于美国、澳大利 规模化奶牛场牛病毒性腹泻一黏膜病疑似病例中采 亚、英国、新西兰、匈牙利、加拿大、阿根廷、日本、印 集病料，将处理好的病料接种MDBK细胞，盲传9 度等国家。李佑民等[1 首次从流产胎儿的脾脏中分 代，在MDBK细胞上产生细胞病变，主要表现为细 离到BVDV。我国新疆、内蒙古、青海、河北、山东、 胞界限不清、细胞内空泡和细胞层形成空斑，与标准 四川等2O多个省市自治区查出了该病[2- 。由于 毒株产生的细胞病变相同。经双抗体夹心ELISA BVDV与同属内的猪瘟病毒(Classical swine fever 检测，结果表明分离到的毒株为BVDV。病毒分离 virus，CSFV)和绵羊边界病毒(Border disease vi— 鉴定诊断可靠，但操作麻烦，耗时费力，且分离率较 rus，BDV)存在抗原相关性，血清学上存在交叉反 低，不适合大规模的流行病学调查。 应，而且能够突破宿主特异性发生交叉感染，BVDV 2 琼脂扩散试验 不仅可感染牛，也能感染绵羊、山羊、猪、鹿和其他反 取糜烂或溃疡病变组织周围的黏膜，不经任何 刍动物[4]。在我国进口动物检疫对象中，牛病毒性 处理，直接与抗BVDV阳性血清进行琼脂扩散试 腹泻一黏膜病被列为二类传染病[5]。近年来我国奶 验。据统计，约有6O 的病牛呈现阳性反应。这种 牛进口数量急剧增加，该病已成为当前严重危害我 方法操作简便、快速，但特异性差，检出率低，易造成 国养牛业的传染病之一。由于大部分感染BVDV 漏诊、漏检。据试验报道，琼脂扩散试验与微量中和 的牛不表现特征的临床症状和病理变化，而且引起 试验(neutralization test technique，NT)阳性率之间 腹泻和消化道黏膜糜烂或溃疡的疾病很多，所以确 差异极显著(P0．01)。 诊需进行实验室检查。实验室检测BVDV的主要 另外，还可以用标准BVDV抗原来检测血请中 方法有病毒分离鉴定、动物接种、血清学试验、免疫 的抗体。这种方法只能粗略测定被检血清中的抗体 荧光技术、分子生物学技术等。 效价，其敏感性不如血清中和试验。Hopkinson等 1 病毒分离鉴定