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医学微生物学 实验 脓汁和粪便标本中病原菌的检测-6
显微镜各部件名称 * 开关与调整光强 开或关之前,必须将亮度调整旋钮②按箭头相反方向转动到最小位置,以免损坏灯泡。 电源开关①拨到∣侧为开,拨到○侧为关闭。 按箭头方向转动亮度调整旋钮②变亮,相反方向转动则变暗。 * 放置标本 按箭头方向转动粗调旋钮②降下载物台。 按箭头方向拉开载物台标本夹③ ,自前向后将标本片放入平台,标本夹③ 轻轻放回原位。 转动上侧垂直移动杆④和下侧水平移动杆⑤,移动标本至光路中间。 * 载物台位置刻度 载物台上的刻度方便确定标本位置,标本移动后可以快速回到原位。 水平刻度的标识位置以机械载物台的①位置来读取。 垂直刻度的标识线以②的位置来读取。 * 聚焦 从显微镜的侧面观察,按箭头方向转动粗调旋钮①,使物镜③尽可能接近标本。一边看目镜,一边慢慢逆箭头方向转动粗调旋钮①, 使载物台下降。 看到标本以后,用微调旋钮②来正确对焦。★10倍物镜的工作距离(WD,从物镜到标本的 距离)为10.5mm。 ★油镜的WD为0.13mm。 * 调整瞳距 调整瞳距是调整双目间的距离,使两眼同时看到一个显微镜像,能防止观察时的疲劳。 方法:一边看目镜,一边移动双目镜筒,让左右的视野一致。 标识●的位置表示瞳距。请记住自己的瞳距值,以便下次观察时调整。 * 调整屈光度数 调整观察者左右视力。 以右眼看右侧的目镜,旋转粗微调旋转盘,对好焦距。 以左眼看左侧的目镜,旋转屈光度调整环①,对好焦距。 * 调整聚光镜位置和孔径光阑 用聚光镜上下移动旋钮①,将聚光镜转到最上面。 在孔径光阑环②上刻有物镜倍率(10倍,100倍等),观察时将与使用物镜相对应的倍率放到正面。 * 转换物镜 旋转物镜转盘①,将希望使用的物镜(10倍、100倍)转到标本的上方。 * 100倍浸油物镜使用方法 油镜放入光路之前,一定要在标本的观察部位上加一滴浸油。 旋转物镜转盘,使油镜进入光路,用微调旋钮对好焦距。 如果浸油内有气泡,会影响观察,可稍微旋转物镜转盘,使油镜来回通过1~2次浸油,排除油内气泡。 * 显微镜油镜的使用P13 10×物镜→标本位置→滴加香柏油→100×油镜→浸泡油中,几乎与标本接触(工作距离0.13mm)→细调节调焦,观察物像→记录结果→关闭电源。 油镜处理:擦镜纸拭去香柏油 →擦镜纸沾少许乙醇和乙醚(7:3)混合液擦拭→擦镜纸擦拭油镜。 显微镜罩上防尘罩→ 横放在实验柜内。 ★(顺德校区)实验台两侧的电源插座,只能插入一个插头,请选择离你最近的电源插座。 ★(校本部)实验台中间,三个位的插座,中间那位插孔没有电,不能使用,只能用两侧的插座。 * 细菌的显微镜检查法 显微镜:光学显微镜 目镜:10倍 物镜:油镜头(90或100倍) 放大倍数:10×90或100=900或1000 镜油:香柏油或石蜡油 香柏油折射率(n=1.515),玻片折射率(n=1.52),石蜡油(n=1.46),空气(n=1.00)。 ★油镜使用完毕必须擦拭油镜头。 * 油 透镜 光线 载玻片 * 思考题 在微生物学实验中,怎样才能避免杂菌的污染? 空气的卫生标准规定如何? 你的实验结果说明了什么问题? 怎样从医务人员手指上分离和鉴定金黄色葡萄球菌? 菌落特征主要描述哪几方面问题?任何挑选单菌落? * 医学微生物学实验综合性实验三、一 空气、手指皮肤的细菌学检查结果分析 脓汁和粪便标本中病原菌的检测 菌落特征观察P11 细菌纯培养P10(纯培养不得超过18小时) 油镜使用方法(讲解) 脓汁标本检验 (录像) 肠道致病菌的分离鉴定(录像) * 常用器材摆放顺序:电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。 试管架上器材:按接种针、接种环、油性笔和打火机的顺序,分别放置在试管架中间两行,靠近电源插座一侧。 ※器材使用以后,必须放回原处,依次摆整齐。 * 实验室器材 整齐有序 * 医学微生物学实验综合性实验三 空气的细菌学检查结果分析 手指皮肤的细菌学检查结果分析 空气的细菌学检查 组号 时间 地点 菌落形成单位(CFU) 1 15 2 15 3 15 4 15 5 15 6 15 7 15 8 15 9 15 10 15 CFU /m3 = 50,000N÷AT ≈86N(直径7cm平板) N:平板上的菌落数 A:平板面积(38.5cm2) T:采样时间(15分钟) CFU:colony forming unit * WHO推荐的医院各部门空气细菌标准 级别 cfu/m3 适用范围 Ⅰ级区 <10 器官移植、心血管、矫形等外科手术室,保护性隔离室,灌注或配制注射液实验室 Ⅱ级区 <200 无菌室、手术室、供应室、婴儿室、中心灭菌单位、术后恢复室、早产儿及产房、重症监护病房 Ⅲ级区 200~500 一般病房、治疗室、放射室、衣
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