饲料养分瘤胃降解率测定.pptVIP

饲料养分瘤胃降解率测定 报告人：陈 博 2014.05.06 前言 目前，尼龙袋法是评定饲料养分瘤胃动态降解率和有效降解率的常用方法。本方法采用数学非线性回归拟合方法来对获得的各时间点降解率数据进行瘤胃食糜流通速度（Kp）影响因素的权重处理，进而将降解率数值改为用瘤胃养分有效降解率（ED，effective degradability）指标。 原理：在瘤胃内放置装有少量饲料样本的尼龙袋发酵降解少量饲料样本，培养一定时间后，根据袋内饲料样本某样分含量的减少，计算其在瘤胃中相应时间点的消失率，再根据各时间点的消失率来计算有效降解率。 优点：饲料数量少；不影响瘤胃正常发酵； 袋内环境与瘤胃内环境能够保持一致。 试验所需材料 瘘管动物：装有瘘管的反刍动物（牛、羊），瘘管手术后至少恢复一个月再进行试验，根据相应饲养标准配制日粮，按1.3倍维持水平饲养，测定前进行预饲至少15天，预饲期和测定过程中不能更换日粮，不能对试验动物进行免疫、治疗及实施其他可能干扰瘤胃消化机能的任何措施 ； 被测样本：自然状态风干或65℃烘干，2.5mm筛孔粉碎； 尼龙袋：选择孔眼为40～60 ?m的尼龙布，制成长×宽为8 cm×12 cm的尼龙袋，袋底部两角呈钝圆形，以免样本残留。尼龙袋用细涤纶线双线缝合，使用前清洗干净并进行65℃烘干 ； 半软塑料管（输液管）：用于固定尼龙袋，并保证装有待测样品的尼龙袋始终沉浸于瘤胃食糜中。为了不使管轻易断裂，可以用对折后鱼线穿在管中，用针线将装有样本的尼龙袋缝在该管上。 操作步骤 称样 用分析天平称取烘干后尼龙袋的重量，称取精饲料样品每个袋10-15 g，粗饲料样品每个袋2-5 g，并小心放入尼龙袋底部，注意袋口处切勿沾染样品。尼龙袋和待测样品均精确至0.0001克，每根管上可以缝2个或4个尼龙袋。 放置尼龙袋 在早晨饲喂前2 h，将固定尼龙袋的半软塑料管连同尼龙袋一起送入瘤胃腹囊食糜中。用塑料管内的鱼线将半软塑料管固定于瘘管盖上。每头（只）试验动物放置的软管数根据实际情况而定，一般每只羊最多可以放4根管，没根管上缝4个尼龙袋，共16个尼龙袋。由于牛的瘤胃相对较大，可以放置更多的尼龙袋； 放置时间设定 尼龙袋在瘤胃的停留时间：精料一般为2、6、12、24、36、48 h，粗料为6、12、24、36、48、72 h。即在放袋后的每个时间点各取出2个尼龙袋，直至把所有的尼龙袋取完。 也可根据待测样品的降解特性适当增加培养的时间点 。 冲洗 将取出的尼龙袋浸泡在冰水中，并立即用自来水冲洗，在冲洗过程中可用手轻轻抚动袋子，不要搓洗，直至水清为止。在冲洗过程中严格防止尼龙袋中的残余物随水逃逸，最后将冲洗后的尼龙袋放在65℃烘干 。 样品与培养残余物目标成分含量的分析 样品和培养的残渣烘干后，将同一时间点的袋内残渣混合均匀作为待测样品，测定其目标成分的含量。 样品空白试验 某些细小的样本颗粒可能不经瘤胃降解就迅速通过尼龙袋孔逃逸，此部分实际上并未真正参加瘤胃的降解过程，因而应从装袋样品中扣除。这部分未经瘤胃降解就直接从尼龙袋中逃逸的样品可通过空白试验进行校正，即在进行上述操作的同时，按以上完全一样的步骤操作另装2个尼龙袋，但不将其放入瘤胃内，然后进行冲洗、烘干处理。 结果计算 采用下式计算装袋样品干物质逃逸率： 校正装袋样品量的计算： 校正装袋样品量（g）＝ 实际装袋样品量（g）×（1－样品逃逸率（％）） 目标成分降解量的计算 采用下式计算样品各目标成分各培养时间点的降解量： 某目标成分某培养时间点的降解量（g）＝[ 校正装袋样品量（g）× 空白试验残余物中某目标成分的含量（％）] － [ 某培养时间点残余物的重量（g）× 某培养时间点残余物中某目标成分的含量（％）] 目标成分实时降解率的计算 降解参数的计算 饲料中某成分在瘤胃中的实时降解率符合指数曲 线：P = a + b（1－e-ct） P 为t时刻被测样品某目标成分的实时瘤胃降解率，%； a 为被测样品某目标成分的快速降解部分，%； b 为被测样品某目标成分的慢速降解部分，%； c 为b部分的降解速率，%/h； t 为饲料在瘤胃内停留的时间，h。 利用各培养时间点实时降解率的数据（P和t），采 用最小二乘法，或统计软件中的非线性回归程序， 或饲料瘤胃降解参数计算软件，计算式中a、b和c 值。 有效降解率的计算 利用上述的计算结果（a、b、c值）采用下式计算待 测饲料目标成分的有效降解率：P = a + bc /（c+k） k 为待测样品某目标成分的瘤胃外流速率，%/h。k值可按本 规程的附录《反刍动物饲料瘤胃外流速率