肌抑素（基因突变体活性区的.PDFVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ()* + ! ,) +# 年 月 $%% ’ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 -.*/ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 肌抑素（ ）基因突变体活性区的 !#$%%’( 克隆、表达及活性的研究 杨兴元 侯 健 安晓荣 关 宏 苟克勉 杨树洪 陈立栋 陈永福 （中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，生物学院，北京 !%%%# ） 摘 要 肌抑素C/)DB7B; 是肌肉发育的重要抑制因子，肌抑素的突变，使其抑制功能的全部或几乎全部丧失，表现 为肌肉细胞的增大和肌纤维束的增加。采用 技术，从肌抑素天然突变的双肌牛皮尔蒙特（ ）的基因 EFG E;5H:)B5D5 组中扩增得到肌抑素突变体的活性区，并将其亚克隆到@CI!104 载体上，利用基因重组技术，构建原核表达质粒 （ ） ，在大肠杆菌中高效表达，采用亲和层析法纯化表达产物，并将其共孵育于离体培养的绵 @94%7 J K 7B;)K C/)DB7B; 羊肌肉细胞，检测肌抑素突变体的生化活性，结果显示肌抑素的突变体具有促进肌肉细胞增生和增殖的功能。 关键词 牛C/)DB7B;，突变体，肌肉细胞，增殖增生 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） L’1 3 !%%%0%2! $%% %#0%#1%0%# 肌肉的产量是肉用家畜和家禽的重要经济性状，对饲养 量，就成为另一种技术选择。作为这一条思路的可行性研 业的经济效益起决定性作用。半个世纪以来，育种工作者通 究，本文报道克隆和表达皮尔蒙特牛的肌抑素基因活性区突 过常规育种方法，培养出许多生长速度快、瘦肉率高、节省饲 变基因，并通过离体培养的肌肉细胞检测其生理活性。 料的畜群品种，并且研究了主宰这些优良经济性状的主效基 ) 材料与方法 因，其中最使人感兴趣的是造成牛肌肉异常发达的“双肌”性 状的基因。$%%! 年，由C;=5* M5)NO5D 领导的研究组，历经十 )* ) 化学试剂和实验材料 大肠杆菌 、 为本实验室冻存，绵羊骨骼肌来 余年的研究，发现比利时蓝牛（ ）的双肌性状是由 IVU PS$! P5*O;.: P*.5 ! ［］ 于肌抑素基因突变造成的! 。与此同时，由美国农业部的 自昌平实验站。各种限制酶购自美国EN):5O7 ,9P 公司， 4;: Q:;B= 领导的研究组和由霍普金斯大学的Q5R; S55 领导 H,4ED、丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺及培养基、蛋白胨、购自Q;O0 的研究小组也发现比利时蓝牛以及皮尔蒙特牛（