转修饰豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(sck)玉米(zea mays l.)植株的获得及其抗虫性分析.pdfVIP

李慧芬等：转修饰豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（ ）玉米（ ）植株的获得及其抗虫性分析 sck Zea mays L . 转修饰豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（ ）玉米（ ） sck Zea mays L . 植株的获得及其抗虫性分析! 李慧芬 李旭刚 吴 茜 陈 蕾 徐鸿林 朱 祯# （中国科学院遗传研究所 北京 100101） 摘 要 利用基因枪法将修饰的豇豆胰蛋白酶基因（ ）导入玉米优良自交系 及 sck E28 340 的胚性愈伤组织中，经筛选剂 PPT 3 次筛选及再生过程，获得可育的再生植株。经 PCR 及Southern bIot 分子检测，证实所获得的再生植株为转基因植株。豇豆胰蛋白酶抑制 剂抑制活性检测及抗虫结果显示：外源基因在植物已获表达，部分转基因植株具有较强的 抗虫活性。 关键词 胰蛋白酶抑制剂基因，遗传转化，玉米自交系，抗虫性分析 进行了有益的探索，并取得了理想的效果。我们对 0 引言 基因的 ’端添加信号肽 编码序列和 ’端 cp ti 5 SKTI 3 添加内质网滞留信号KEDL 编码序列进行修饰，使 玉米是重要的粮食和饲料作物，但是由于害虫 其表达产物定位于内质网及其衍生的蛋白体内，提 的危害，每年玉米产量损失占总产量的13% 左右。 高了CpTI 在细胞内积累量。本文利用基因枪将 sck 转苏云金芽胞杆菌（ ， ）毒蛋 Bacillus thuringiensis Bt 基因导入玉米优良自交系中，并对转基因植株的抗 ［］ 1 白基因抗虫玉米（ 玉米） 年商品化的应用 ， Bt 1996 虫性进行了初步分析。 不仅大幅度减轻螟虫对玉米生产的危害，而且还减 轻因使用化学杀虫剂造成的环境污染，保护生态环 1 材料和方法 境。但是由于害虫易对Bt 毒蛋白产生耐受性，因此 有可能影响田间防治效果和可持续应用。目前，常 1. 1 材料 用几种方法来控制害虫产生耐受性，如在大面积种 植物材料为玉米优良自交系 、 。用于基 E28 340 植转Bt 毒蛋白基因植物的地区，种植一些易感虫品 因枪转化的质粒为