黄芪多糖对脑死亡状态下肝脏的保护作用 - 中国普外基础与临床杂志.pdf

中国普外基础与临床杂志 2017年3月第24卷第3期 • 275 •   ·论 著· 黄芪多糖对脑死亡状态下肝脏的保护作用 1 1 1 1 1 2 1, 2 1 1 林熠 ，李明霞，王彦峰，范晓礼，钟自彪，肖琦，叶啟发 ，李玲，彭贵主 1. 武汉大学中南医院武汉大学肝胆疾病研究院 武汉大学移植医学中心 移植医学技术湖北省重点实验室（武汉  430071 ） 2. 中南大学湘雅三医院卫生部移植医学工程技术研究中心（湖南长沙  410013 ） 【摘要】   目的    探讨脑死亡状态下黄芪多糖（Astragalus polysaccharide ，APS ）对肝脏损伤的保护作用及其机 制。方法    将 24 只健康成年雄性新西兰兔随机分为 3 组：空白对照组、脑死亡组和 APS 组，每组 8 只。3 组均于 处理后 4 h 和 8 h 时处死 4 只新西兰兔获取血液和肝组织标本。空白对照组：于颅顶钻孔、颅内置 Foley 球囊导 管，但不加压，维持麻醉。脑死亡组：建立渐进性颅内加压脑死亡模型。APS 组：诱导麻醉后立即经股静脉推注 注射用 APS 12 mg/kg ，建模处理同脑死亡组。采用全自动生化分析仪检测血液标本中的血清天冬氨酸氨基转移酶 （aminotrans-ferase ，AST ）和丙氨酸氨基转移酶（alanine amino-transferase ，ALT ）水平，采用 ELISA 试剂盒检测肿 瘤坏死因子 α （TNF-α ）水平；采用 HE 染色观察肝脏组织的组织学变化；采用 SP 免疫组化染色方法检测肝脏组 织中核转录因子 p65 蛋白（NF-κB p65 ）的表达。结果    ① ALT 和 AST 。不论是 4 h 还是 8 h 时，同时点与空白对 照组比较，脑死亡组和 APS 组的 ALT 和 AST 水平均较高（P0.05），且各时点脑死亡组的 ALT 和 AST 水平均高于 APS 组（P0.05）。同组内比较，8 h 时空白对照组的 ALT 和 AST 水平与 4 h 比较差异均无统计学意义（P0.05）； 8 h 时脑死亡组的 ALT 和 AST 水平与 4 h 时比较均升高（P0.05）；8 h 时 APS 组的 ALT 水平与 4 h 比较有所升高 （P0.05），但 AST 水平与 4 h 比较差异无统计学意义（P0.05）。② TNF-α 。不论是 4 h 还是 8 h 时，同时点与空 白对照组比较，脑死亡组和 APS 组的 TNF-α 水平均较高（P0.05），且各时点脑死亡组的 TNF-α 水平均高于 APS 组（P0.05）。同组内比较，8 h 时空白对照组的 TNF-α 水平与 4 h 比较差异无统计学意义（P0.05）；8 h 时脑死亡 组和 APS 组的 TNF-α 水平比 4 h 均有所升高（P0.05）。③ HE 染色结果。4 h 时空白对照组、脑死亡组和 APS 组 的肝脏组织结构基本正常，无明显改变。8 h 时脑死亡组的肝细胞呈气球样改变，排列紊乱，胞质疏松淡染呈网 状，汇管区见大量炎性细胞浸润，表现为较为明显的组织损伤。8 h 时 APS 组的肝细胞轻度水肿，排列正常，少量 炎性细胞浸润，组织形态损伤较脑死亡组 8 h 时明显减轻。④ SP 免疫组化染色结果。4 h 时空白对照组、脑死亡 组和 APS 组肝组织中 NF-κB p65 蛋白的表达水平比较差异无统计学意义（P0.05）。8 h 时脑死亡组和 APS 组肝组 织中 NF-κB p65 蛋白的表达水平均高于空白对照组 8 h 时（P0.05），且脑死亡组肝组织中 NF-κB p65 蛋白的表达 水平高于 APS 组（P0.05）。同组内比较，8 h 时空白对照组肝组织中 NF-κB p65 蛋白的表